Kultur Primer Fibroblas: Penelitian Pendahuluan

Abstract

AbstrakKultur sel fibroblas banyak digunakan untuk penelitian proses penyembuhan luka dan penuaankulit. Metode ini digunakan untuk melihat perkembangan sel, proliferasi kinetik seluler, sertabiosintesis komponen matriks ekstraseluler. Penelitian pendahuluan ini dilakukan untuk optimasiteknik laboratorium serta berbagai kendala yang didapatkan saat kultur fibroblas. Kultur primerfibroblas dibagi menjadi 2 jenis sampel yaitu sampel yang berasal dari embrio mencit usia 7,5–9,5 hari, dan kulit pasien keloid. Sampel dari embrio mencit dilakukan kultur primer denganmetode dissociated fibroblast. Sampel jaringan keloid dan kulit normal dikultur dengan metodeskin explant. Fibroblas yang berasal dari kultur primer embrio mencit tumbuh baik sehinggadapat dilakukan subkultur dan disimpan di dalam nitrogen cair suhu -198°C. Fibroblas yangberasal dari sampel keloid pertama tumbuh sesuai pola pertumbuhan fibroblas, namun padasampel kedua terdapat kontaminasi Paecilomyces sp. yang merupakan salah satu jenis jamurkontaminan. Sel fibroblas mudah untuk dikultur karena memiliki kemampuan tumbuh danmelekat yang tinggi serta regenerasi cepat, namun penelitian lebih lanjut untuk optimasi teknikkultur dan pencegahan kontaminasi masih dibutuhkan sehingga sel dapat tumbuh baik.AbstractFibroblast cell culture method has been used for wound healing and skin aging studies. Thismethod was used for cell development imaging study, celullar kinetic proliferation andextracelullar matrix component biosynthesis. This preeliminary study was done for laboratoricaltechnic optimation as well as problems appeared in fibroblast culture. Fibroblasts primary culturewas divided into 2 type of samples, from 7.5-9.5-day-mice embryo and keloid-patient skin.Primary culture with dissociated fibroblast method was done for mice embryo sample. Keloidtissue sample and normal skin were cultured with skin explant method. Fibroblasts that weretaken from mice embryo primary culture grew well therefore subculture can be done and kept in -198°C liquid nitrogen storage. Fibroblasts that were taken from first keloid sample grewaccording to fibroblast growth pattern, but, there was contamination with Paecilomyces sp. whichwas one of the contaminating fungi. Fibroblast cells are easy to be cultured as they have growthability and high adhesion capability as well as rapid regeneration, but, further study for culturedtechnical optimation and contamination prevention are still neededthereforethe cells can growwell.

Penurunan Produksi Reactive Oxygen Species (ROS) Fibroblas dengan Nano Kitosan Kumbang Tanduk (Xylotrupes gideon)

“…Fibroblas merupakan sel yang umum ditemukan dalam jaringan ikat (Gabbott dan Sun, 2018), serta memiliki kemampuan untuk memproduksi substansi protein serat dan substansi dasar yang penting dalam proses penyembuhan luka (Kurniawati et al, 2015). Selama penyembuhan luka, fibroblas berperan dalam proses fibroplasia, yang melibatkan pembentukan pembuluh darah baru, migrasi dan proliferasi fibroblas, deposisi matriks ekstraseluler, serta organisasi jaringan fibrous (Masir et al, 2012).…”

Toksisitas Sabut Kelapa (Cocos Nucifera L.) terhadap sel Fibroblas sebagai Bahan Penguat Resin Komposit

“…Nilai persentase viabilitas kontrol media diasumsikan 0%. Di sisi lain, nilai persentase viabilitas kontrol sel diasumsikan 100% (Kurniawati et al, 2015). Program SPSS 17.0 yang mengolah taraf signifikansi 95% (p<0,05%) digunakan pada penelitian ini.…”

“…Dasar uji enzimatik MTT yakni kemampuan sel hidup diukur berdasarkan aktivitas mitokondria dari kultur sel. Untuk pengukuran proliferasi seluler secara kuantitatif atau pengukuran jumlah sel yang hidup uji ini banyak digunakan (Kumar and Pandey, 2013;Kurniawati et al, 2015). Pada hasil dapat diketahui bahwa tingkat konsentrasi serat sabut kelapa semakin tinggi maka persentase kematian gingival fibroblas cells (GT1) semakin meningkat (Kurniawati et al, 2015).…”

“…Untuk pengukuran proliferasi seluler secara kuantitatif atau pengukuran jumlah sel yang hidup uji ini banyak digunakan (Kumar and Pandey, 2013;Kurniawati et al, 2015). Pada hasil dapat diketahui bahwa tingkat konsentrasi serat sabut kelapa semakin tinggi maka persentase kematian gingival fibroblas cells (GT1) semakin meningkat (Kurniawati et al, 2015). Perubahan permeabilitas membran sel merupakan pengaruh yang timbul terhadap viabilitas sel GT1.…”

“…Sel menjadi non viabel dan kematian sel dapat terjadi disebabkan oleh karena membran sel yang rusak. Trypan blue dapat menembus membran sel yang non-viabel sementara membran sel yang viabel impermiabel terhadap trypan blue (Kurniawati et al, 2015;Noorunnisa Khanam, et al, 2010). Semakin besar pengaruh yang ditimbulkan akan menyebabkan persentase kematian sel semakin bertambah atau dengan kata lain sel mati semakin banyak.…”