l-Selectin and Chemotaxis Throughout Bone Marrow Granulocyte Maturation in the Bovine

Abstract

Polymorphonuclear neutrophilic leukocytes (PMNL) play a pivotal role during inflammation. Bone marrow (BM) reserves are depleted as cells are released into circulation for recruitment to infection sites. Expression of L-selectin on the cell membrane allows neutrophils to roll along the activated endothelium. Whereas mechanisms leading to recruitment to infection sites are well established, expression of BM adhesion molecules in cows is limited. In this study, we assessed Lselectin expression and chemotactic response to zymosan-activated serum (ZAS) in bovine BM cells and in circulating neutrophils. Isolated blood PMNL and BM cells were used from 9 dairy cows, for quantifying Lselectin expression using flow cytometry, and from 12 dairy cows for chemotaxis studies. All granulocytic maturation stages expressed L-selectin. The percentage of cells fluorescing increased significantly in BM band and mature granulocytes and reached maximal expression on circulating neutrophils. Bone marrow band and segmented cells showed the highest L-selectin density. Chemotaxis through micropore filters in response to zymosan-activated fetal bovine serum was first observed in the myelocytic and metamyelocytic stages, and it increased with maturation and release into the blood stream. From these results, we conclude that Lselectin expression varies among stages of granulocytic maturation within the BM and differs from circulating PMNL. Further, BM cells are capable of migration starting at the metamyelocytic stage, and compared with BM cells, circulating neutrophils are more chemotactively active. 3350Abbreviation key: BM = bone marrow, %F = percentage of cells fluorescing, MFI = mean fluorescence intensity, SDF = stromal-derived factor, ZAS = zymosanactivated serum.

Astragalus polysaccharide promotes the release of mature granulocytes through the L-selectin signaling pathway

“…The activation of human granulocytes via cross-linking between L-selectin and its antibody can increase intracellular Ca 2+ concentration [ 29 ], production and phosphorylation of superoxides [ 30 ], and activation of key signalling proteins [ 31 ]. Cross-linking of L-selectin and its ligand as sulphated galactocerebroside increased the expression of TNF-α and IL-8 [ 10 ], causing granulocytes to penetrate the layer of human umbilical vein ECs.…”

Avaliação funcional dos fagócitos sanguíneos e lácteos de vacas naturalmente infectadas pelo vírus da leucose dos bovinos

“…No leite de mamas infectadas, as células polimorfonucleares são predominantes (acima de 90%) (POLITIS et al, 1991;PARK et al, 1992;LEITNER et al, 2000;PILLAI et al, 2001;BAUMERT et al, 2009). Essas células desempenham um importante papel durante a inflamação (MONFARDINI et al, 2004) e são liberadas da medula óssea para a circulação sanguínea para atingir o foco da inflamação (MONFARDINI et al, 2004).…”

“…A importância dos linfócitos T na resposta imune da glândula mamária foi comprovada por Harp et al (2006) Portanto, na presença de um processo infeccioso, a resposta imune inata é caracterizada por uma seqüência de eventos que inclui a ativação celular, adesão, migração para o local da inflamação e a remoção de patógenos invasores pelos fagócitos (PICCININI et al, 1999;RIVAS et al, 2002;. Uma vez que os patógenos são identificados, os macrófagos residentes liberam citocinas, ecosanóides, proteínas de fase aguda e substâncias quimiotácticas que provocam uma migração direta das células polimorfonucleares do sangue para o foco inflamatório (LEITNER et al, 2000;MONFARDINI et al, 2004;SLADEK et al, 2010;CONEJEROS et al, 2011;RYSANEK, 2011 YAGI et al, 2002;MONFARDINI et al, 2004;RYSANEK et al, 2006;SOHN et al, 2007;. O aumento da expressão de CD11b e CD18 e a redução acentuada da expressão de L-selectina (CD62L+) têm sido observadas nas glândulas mamárias de vacas induzidas com LPS ou em vacas infectadas com bactérias Gram-positivas (VAN OOSTVELDT et a., 2001;YAGI et al, 2002;RYSANEK et al, 2006;SOHN et al, 2007).…”

“…BAUMERT et al, 2009;SLADEK et al, 2010). Sabe-se que diante de um processo infeccioso e/ou inflamatório, a rápida diapedese das células polimorfonucleares para a glândula mamária atrasa a apoptose, aumenta a viabilidade celular (RIVAS et al, 2001;PRIN-MATHIEU et al 2002;BOULET et al, 2004;MEHRZAD et al 2004) e reduz a produção de peróxido de hidrogênio intracelular no foco inflamatório (SMITS et al, 1999 (MONFARDINI et al, 2004;VANGROENWEGHE et al, 2004). Aproximadamente 48 horas após a infecção intra-mamária por Escherichia coli, os leucócitos circulantes apresentaram valores normais e a expressão da L-selectina pela superfície celular aumentou.…”

“…Aproximadamente 48 horas após a infecção intra-mamária por Escherichia coli, os leucócitos circulantes apresentaram valores normais e a expressão da L-selectina pela superfície celular aumentou. Estes resultados sugerem que após o início da infecção aguda, o estímulo quimiotáctico induzido pela endotoxina bacteriana causou uma maior mobilização das células da medula óssea (MONFARDINI et al, 2004).…”