Maturação in vitro de oócitos bovinos em meios suplementados com quercetina e seu efeito sobre o desenvolvimento embrionário

Abstract

RESUMOA quercetina é um flavonoide, amplamente encontrada em frutas, vegetais, grãos, flores, com elevada concentração no vinho tinto, e tem sido caracterizada funcionalmente pela atividade antioxidante. Para avaliação da maturação nuclear e do desenvolvimento embrionário bovino, os oócitos foram maturados por 22h na presença de quercetina (0,4, 2, 10 e 50M), cisteamina (100M) e na ausência dos antioxidantes. Os oócitos maturados foram corados com Hoechst para avaliação da maturação in vitro. Para avaliação do desenvolvimento embrionário, os oócitos foram fertilizados e cultivados in vitro, as taxas de desenvolvimento embrionário foram determinadas no sétimo dia de cultivo e o percentual de eclosão e o número de células dos embriões no oitavo dia. Os níveis de glutationa (GSH) dos oócitos foram mensurados por emissão de fluorescência com CMF 2 HC. A porcentagem de maturação nuclear (±89%) não diferiu entre os grupos. O desenvolvimento embrionário variou entre os tratamentos, o percentual de blastocisto foi superior (P<0,05) nos grupos tratados com 0,4, 2, 10 e 50M de quercetina (56,9, 59,5, 53,6 e 49,6%, respectivamente) e com 100M de cisteamina (50,4%) em relação ao grupo controle (42,3%). Na comparação entre os dois antioxidantes, a quercetina (0,4 e 2µM) foi superior na produção de embriões (56,9 e 59,5%, respectivamente) em comparação com cisteamina (50,4%). As taxas de embriões eclodidos foram similares (P>0,05) entre os grupos (±63,0%). O número médio de células dos embriões também foi similar entre os grupos (±233). Os níveis intracelulares de GSH foram superiores nos oócitos maturados com cisteamina, mas similares entre os oócitos tratados com quercetina e o controle. A suplementação da maturação in vitro com antioxidantes melhora as taxas de blastocistos. A quercetina foi superior à cisteamina, que, por sua vez, foi superior ao controle. Mas os níveis de GSH foram superiores somente nos oócitos tratados com cisteamina. Palavra-chave: antioxidante, bovino, embrião, quercetina e oócito ABSTRACTQuercetin is a flavonoid widely found in fruit, vegetables, grains and flowers, with a high concentration in red wine, and has been functionally characterized by its antioxidant activity. For assessment of nuclear maturation and bovine embryo, oocytes were matured for 22h in the presence of quercetin (0.4, 2, 10 and 50µM), cysteamine (100µM)

Lycopene Supplementation to Serum-Free Maturation Medium Improves In Vitro Bovine Embryo Development and Quality and Modulates Embryonic Transcriptomic Profile

“…Thus, it is plausible to see an increasing number of reports emphasizing the beneficial role of the antioxidant supplementation of maturation medium to overcome oxidative stress [ 35 ]. Multiple studies reported an increase in blastocyst rate when the IVM medium was supplemented with different antioxidants, such as nobiletin [ 36 ], quercetin [ 37 ], vitamin C [ 38 ], and resveratrol [ 39 ]. Chowdhury et al [ 10 ] were the first to evaluate the effect of lycopene in IVM in a bovine model.…”

Quercetin protects porcine oocytes from in vitro aging by reducing oxidative stress and maintaining the mitochondrial functions

“…Reactive oxygen species (ROS) are common metabolites produced during IVM of oocytes. Physiological levels of ROS are necessary for normal development of oocytes, and ROS act as signaling molecules and regulate the cell development cycle and apoptosis ( Guemra et al, 2013 ). However, high levels of ROS can be generated during IVM because of excessive in vitro manipulation of oocytes and hyperoxia stress, which is a negative factor affecting the IVM rate of oocytes ( Pu et al, 2014 ).…”

Performance of zebu donor cows in vitro production of embryos

“…The IVP process for cattle involves several steps, from the oocyte collection in the farms to the laboratory. Moreover, factors inherent or not inherent to the donor, such as race, age, estrous phase, nutrition, seasonality , hormone stimulation (Silva et al, 2017), number of OPU sessions (Gimenes et al, 2015), embryo culture media (Guemra et al, 2013), and semen used for in vitro fertilization (IVF) (Fernandéz-Gonzalez et al, 2008) can affect the results.…”