Optimization of chemically defined cell culture media – Replacing fetal bovine serum in mammalian in vitro methods

Animal‐cell culture media: History, characteristics, and current issues

“…Thorough studies on past records of successful combinations, if available, are helpful. The following is an example of a protocol when researchers try to implement a serum‐free culture by themselves:131 Try a medium where the ITS supplement is added to DMEM/F‐12.If using glutamine, set its concentration to 2–4 mmol L −1 and consider the stable form: L‐alanyl‐L‐glutamine (see the next section).Add growth factors, hormones, vitamins, trace elements, and lipids according to the requirements of the cell type under study.Pay attention to the osmotic pressure.Use antibiotics as little as possible.When culturing adherent cells, consider using substrates, such as fibronectin and laminin, for cell attachment.For a stirred culture, consider supplementing the medium with protective agents like Pluronic F‐68 to minimize the shear force.Adapt the cells to the new medium with great caution.Verify that the cell performance has not changed in the new medium. …”

Expressão gênica empregando pseudopartículas em células de mamíferos (HEK 293T e Huh 7.0) cultivadas em diferentes meios de cultura livres de soro.

“…O mercado de produção de proteínas pode ser dividido em dois segmentos: proteínas que não são pós-traducinalmente modificadas e as que necessitam de tais modificações Portanto, para se ter um processo de produção viável economicamente, a manipulação genética da célula deve resultar em uma expressão eficiente da proteína de interesse; o meio de cultura selecionado deve ser capaz de suportar o crescimento da célula e a produção da proteína em altos níveis com o menor custo possível e, finalmente, as etapas de upstream e dowstream devem ser desenvolvidas de maneira a se obter altos rendimentos do produto, também com custo reduzido ( VAN DER VALK et al, 2010; ZHU,2012).…”

“…( BIAGGIO et al, 2015 apud VAN DER VALK et al, 2010) FILIPIC et al, 2002), frações de leite bovino ou colostro bovino (BELFORD et al, 1995), extratos de plantas (soro vegetal) (PAZOS et al, 2004) e lisados de plaquetas (JOHANSSON et al, 2003).…”

“…Por um lado, a coleta e a produção do SFB são dois fatores eticamente problemáticos, por isso uma substituição é necessária (BRUNNER et al, 2010;JOCHEMS et al, 2002;VAN DER VALK et al, 2004). Por outro lado, os campos de rápida expansão de célula in vitro, cultura de tecidos, engenharia biomédica e a terapia celular requerem definidas e seguras condições de cultura celular livre de componentes de origem animal (ATALA, 2007;VAN DER VALK et al, 2010). O grande desafio é encontrar substitutos para todos os fatores de crescimento presentes no soro e adaptar cada linhagem em meios livre de soro.…”

“…Por outro lado, estratégias alternativas de expressão gênica têm surgido, algumas se utilizando de diferentes vírus para a produção de partículas semelhantes às partículas virais (TAN, 2006 Além disso, é conhecido por ser um suplemento quimicamente mal definido, tendo variações qualitativas e quantitativas que exibem uma possível fonte de contaminação microbiana como fungos, bactérias, vírus, micoplasma e príons, além de trazer dificuldades no processo de recuperação e purificação do bioproduto devido à presença de outras proteínas não interessantes (BRUNNER et al, 2010;GSTRAUNTHALER, 2003;VAN DER VALK et al, 2010 …”