Atualmente há diversas evoluções metodológicas de ensino. Assim, os cursos de Medicina Veterinária devem se adequar a formação curricular, tanto para o âmbito acadêmico quanto para preparação profissional, buscando novas possibilidades de ensino-aprendizagem centralizadas no discente, inclusive quando comparada a produtividade entre o período matutino e noturno. Com este propósito, foi desenvolvido um questionário, respondido de forma voluntária pelos alunos do curso de Medicina Veterinária, buscando analisar a importância e as dificuldades apresentadas por estes na disciplina de Biotecnologia da Reprodução Animal entre os períodos matutino e noturno. O questionário foi baseado no método observacional descritivo transversal, para coleta de dados foi utilizada a ferramenta online Google Formulários, possibilitando analisar limitações individuais, potenciais, experiências e expectativas sobre o conhecimento acadêmico entre os discentes. Concomitantemente, o questionário avaliou a realidade socioeconômica e cultural dos discentes. Através dos resultados foi possível concluir que alunos do período noturno, devido à realização de outras atividades durante o dia e fatores relacionados com a rotina apresentam maior estresse e cansaço. Tais fatores influenciam diretamente no desgaste físico, psicológico e emocional dos discentes, do período noturno. Assim sendo, alunos de Medicina Veterinária do período noturno, na disciplina de Biotecnologia da Reprodução Animal, apresentam maiores dificuldades de assimilar conteúdo quando comparados aos alunos do período matutino.