Perfil genômico da resposta ao HIV-1 e implicações para a vacina terapêutica com células dendríticas contra o HIV-1.

Abstract

AGRADECIMENTOSÀquela cuja participação nessa dissertação e na minha formação foi de fundamental importância, minha orientadora Alessandra.Ao laboratório de Imunogenética (Pamela, Juliana, Elaine, Jaíne, Alexandre) pela amizade, paciência, colaboração e convivência agradável.Aos amigos do LIM-56 pela disposição do laboratório, dia a dia e bons momentos.À Dra Telma Oshiro e seu grupo (Bruna, Wanessa, Laís, Denise, Nathália, Marcella, Alexandre, "Ana Paula e Alana") por colocar a disposição reagentes, orientar experimentos e dividir comigo momentos de aprendizado e conhecimento e, acima de tudo, amizade .Aos professores Dr. Niels Olsen e Dr. Condino pela disposição dos aparelhos utilizados em alguns dos meus experimentos.Às agências de fomento: CAPES e FAPESP.Aos meus pais pela dedicação e amor incondicional.Aos meus irmãos pelo companheirismo.Àquele que no decorrer dos últimos 2 anos passou de namorado, à noivo e marido sempre dando apoio, forças para continuar e acima de tudo muito amor.Aos meus anjos de patas Glee, Bolinha e Barney por me darem apoio, alegria e esperança quando mais precisava.Enfim, a todos que me ajudaram diretamente e indiretamente nessa etapa, o meu agradecimento! "Rir muito e com frequência; ganhar o respeito de pessoas inteligentes e o afeto das crianças; merecer a consideração de críticos honestos e suportar a traição de falsos amigos; apreciar a beleza, encontrar o melhor nos outros; deixar o mundo um pouco melhor, seja por uma saudável criança, um canteiro de jardim ou uma redimida condição social; saber que ao menos uma vida respirou mais fácil porque você viveu. Isso é ter tido sucesso." A imunoterapia baseada em células dendríticas (DC) tem sido reportada com uma interessante ferramenta para induzir o controle da carga viral plasmática. Neste estudo, foram analisados genes em DC, utilizadas em um ensaio clínico brasileiro, e em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) antes e após o tratamento, com o objetivo de identificar marcadores preditivos da resposta à terapia. Para isso, a expressão gênica de genes envolvidos na resposta anti-HIV foi avaliada em 6 pacientes HIV+ submetidos à imunoterapia as diferentes etapas de diferenciação de monócitos a DC de acordo com o protocolo. Após isso, a expressão diferencial de genes de resposta a vacina e de controle viral do HIV foram avaliados em PBMC obtidos de 6 pacientes HIV+ antes e após o tratamento. Para a expressão diferencial foram utilizados um arranjo de genes comercialmente disponível e um customizado (RT 2 Profiler PCR Array, Qiagen). O perfil de genes de monócitos a DC mostrou que as células podem ser classificadas em dois grupos, um desses grupos mostrou uma ampla modulação de genes anti-HIV que aparentemente correlacionam com o aumento na ativação ou estado de exaustão celular e, possivelmente, com um pior produto vacinal, ainda que essa assinatura gênica não tenha sido estatisticamente associada a uma baixa funcionalidade da DC, talvez pelo limitado número de amostras. As comparações da modulação de expressão gênica em P...