Polymerase chain reaction based detection ofMycobacterium tuberculosisin tissues showing granulomatous inflammation without demonstrable acid‐fast bacilli

Abstract

These results show that in paucibacillary form of cutaneous tuberculosis with unclassical clinical and histological presentation, this PCR system provides rapid and sensitive detection of M. tuberculosis DNA in formalin-fixed, paraffin-embedded specimens. Cutaneous tuberculosis represents a significant proportion in specimens showing granulomatous inflammation. In areas like Taiwan, where prevalence of pulmonary tuberculosis is still high, tuberculosis verrucosa cutis and lupus vulgaris are common forms of cutaneous tuberculosis and are seen more frequently than atypical mycobacterial infection.

Amplificação do DNA de Mycobacterium tuberculosis presente em amostras de esfregaço bucal, pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR)

“…Os primers utilizados na reação de PCR são confeccionados a partir de uma sequência encontrada apenas no DNA do Mycobacterium tuberculosis, o que, se os procedimentos forem corretamente realizados, resguarda a certeza de diagnóstico da TB quando as reações forem amplificadas (AKCAN et al, 1997;CONDOS et al, 1996;EGUCHI et al, 2003;HANCE et al, 1989;HSIAO et al, 2003 (DE WITT et al, 1990;EISENACH et al, 1990). …”

"Avaliação crítica do uso da reação em cadeia da polimerase e exames complementares no diagnóstico da tuberculose cutânea e micobacteriose atípica"

“…(Cook et al, 1994;Telenti et al, 1993;Kox, 1995;Richter et al, 1995;Degitz, 1996;Roth et al, 1997;Chuang et al, 1997;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Ena et al, 2001;Tan et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Senturk et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honoré-Boukaline et al, 2003). Na prática dermatológica diária, sobretudo nos centros de referência e Hospitais Universitários, há com freqüência casos de suspeita diagnóstica de tuberculose cutânea e micobacterioses atípicas que, muitas vezes, não são elucidados.…”

“…Atualmente, o desenvolvimento de técnicas de biologia molecular permite a amplificação de seqüência de ácido desoxirribonucleico (DNA)-alvo, veio contribuir, significativamente, para a diagnose desses casos mais difíceis, além da vantagem de ser um método de alta sensibilidade, especificidade e rápida execução (Cook et al, 1994;Telenti et al, 1993;Kox, 1995;Richter et al, 1995;Degitz, 1996;Roth et al, 1997;Chuang et al, 1997;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Tan et al, 2001;Ena et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Senturk et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honore-Boukaline et al, 2003). Na literatura, encontram-se vários relatos, em especial, com o uso de PCR (reação em cadeia da polimerase) para o diagnóstico da tuberculose e outras micobacterioses atípicas (Telenti et al, 1993;Cook et al, 1994;Kox, 1995;Richter et al, 1995;Degitz, 1996;Chuang et al, 1997;Roth et al, 1997;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Tan et al, 2001;Ena et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Senturk et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honoré-Boukaline et al, 2003). A vantagem do método é que, por meio da amplificação da seqüência-alvo, detecta-se a presença de parte do gene da micobactéria, possibilitando o diagnóstico, mesmo quando os métodos de coloração, imunohistoquímica e cultura são negativos.…”

“…A literatura descreve métodos com emprego de genes que codificam proteínas comuns às micobactérias, como o gene da proteína do choque 65-kDa ("heat shock protein") ou 16S r RNA, ou ainda, 23S RNA e 23S -16S rRNA (Telenti et al, 1993;Cook et al, 1994;Richter et al, 1995;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Ena et al, 2001;Tan et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honore-Boukaline et al, 2003).…”

“…Outra dificuldade de comparação reside na diferente forma de extração dos ácidos nucléicos dos diversos protocolos de ampliação e do padrão-ouro utilizados (Telenti et al, 1993;Cook et al, 1994;Richter et al, 1995;Tan et al, 1999;Quiros et al, 2000;Tan et al, 2001;Ena et al, 2001;Ogusku et al, 2002;Hsiao et al, 2003;Honore-Boukaline et al, 2003). Margall et al (1996) …”