Pretreatment of Cell Suspensions as a Method to Increase the Protoplast Yield of Haplopappus gracilis

Abstract

A low yield of free protoplasts was obtained when fast‐growing cell suspensions of Haplopappus gracilis were treated with Driselase, an active mixture of cellulase and pectinase. If the cells in the suspension culture were pretreated by increased levels of auxin, reduced sugar concentration, addition of sulphur‐containing amino acids, or by the reducing agent mercaptoethanol, protoplasts were released from a higher proportion of the cells. These pretreatments did not adversely effect division of the protoplasts.

Plant Regeneration from Cultured Protoplasts of Higher Plants

“…The effective osmotic concentration will depend on the endogenous cell osmotic pressures at the time of isolation and these are markedly influenced by environmental growth conditions (Shepard and Totten, 1977;Wallin et al, 1977) and age (Kao and Michayluk, 1980) of donor tissues.…”

Callus formation from protoplasts of cell suspension cultures of Rosa ‘Paul's Scarlet’

“…1970), Acer pseudoplatanus (Bright and Northcote 1974) and Nicotiana tabacum (Uchimiya and Murashige 1976) just to mention some of the more frequently used dicots. In others, like Haplopappus gracilis (Wallin et al 1977) or Rosa 'Paul's Scarlet' (Pearce and Cocking 1973), protoplasts were isolated but without regeneration to the callus stage.…”

Determinação de metodologia para oisolamento de protoplastos de tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.)

“…Por essa razão, o número médio de protoplastos isolados por grama de peso fresco de calos de tangerina Cleópatra subcultivados nos meios de cultura MT-S, MT e MT + BAP foi de 2.2 x 10 6 , 1.7 x 10 6 e 1.4 x 10 6 , respectivamente. Os resultados obtidos no presente estudo estão de acordo com as citações de SHEPARD & TOTTEN (1977); WALLIN et al (1977) e SIMMONDS et al (1979, os quais verificaram aumento na eficiência de isolamento de protoplastos com a redução na concentração de sacarose dos subcultivos anteriores ao processo de isolamento. WALLIN et al (1977), atribuíram o aumento na eficiência de isolamento de protoplastos à mudança na composição química da parede celular ocasionada pelo menor teor de sacarose.…”

“…Os resultados obtidos no presente estudo estão de acordo com as citações de SHEPARD & TOTTEN (1977); WALLIN et al (1977) e SIMMONDS et al (1979, os quais verificaram aumento na eficiência de isolamento de protoplastos com a redução na concentração de sacarose dos subcultivos anteriores ao processo de isolamento. WALLIN et al (1977), atribuíram o aumento na eficiência de isolamento de protoplastos à mudança na composição química da parede celular ocasionada pelo menor teor de sacarose. Este procedimento exige menor quantidade de enzima para o isolamento de protoplastos, reduzindo possíveis efeitos de toxicidade.…”