El objetivo de este trabajo fue aplicar la metodología de criopreservación de semen canino en pajilla francesa en el municipio de Medellín- Antioquia. Se realizó una colecta seminal a ocho caninos adultos, por método de mano enguantada, cada eyaculado fue evaluado macroscópica y microscópicamente y posteriormente diluido con Triladyl® a una concentración final de 80 x 106 espermatozoides/ml. Se empacaron en pajillas de 0,5 ml y fueron sometidas a criopreservación con un descenso de temperatura rápido, sometiendo las pajillas a vapores de nitrógeno durante 25 minutos y luego transferidas directamente a nitrógeno líquido (método de pajilla francesa). En el semen fresco, se observó una apariencia blanquecina lechosa, un volumen de 2.27 ml (±1.40) una concentración de 388.5 x106 espermatozoides/ mL (±228.069), una motilidad individual de 79% (± 4%) y un vigor de 3.96 (±0.327). Se obtuvieron 123 pajillas, de las cuales se tomaron 27 aleatoriamente y se les evaluó la motilidad individual (51 ± 19%) y vigor (2.89 ± 1.02). En conclusión, la aplicación de la metodología de criopreservación rápida por pajilla francesa, usando Triladyl® como crioprotector, se sugiere como protocolo eficiente para la criopreservación de semen canino en el municipio de Medellín.