Single human leukocyte antigen flow cytometry beads for accurate identification of human leukocyte antigen antibody specificities

Pei, Rui; Lee, Jar-How; Shih, Neng-Jen; Chen, Mike Y.; Terasaki, Paul I.

doi:10.1097/00007890-200301150-00008

Cited by 374 publications

(266 citation statements)

References 15 publications

Supporting

Mentioning

258

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Class II antigens have generally lower levels of tissue expression than class I antigens and this may affect the ability of the allograft to absorb donor-specific anti-class II antibodies. Serum testing for antibodies was done with a highly sensitive antibody-binding assay with single allele panels using the Luminex platform [30]. Antibody reactivity patterns were analyzed with HLAMatchmaker, a structural matching algorithm that considers amino acid residue polymorphisms to define epitopes recognized by antibodies.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Retransplant candidates have donor-specific antibodies that react with structurally defined HLA-DR,DQ,DP epitopes

Duquesnoy

Awadalla

Lomago

et al. 2008

Transplant Immunology

View full text Add to dashboard Cite

This report describes a detailed analysis how donor-specific HLA class II epitope mismatching affects antibody reactivity patterns in 75 solid organ transplant recipients with an in situ allograft and who were considered for retransplantation. Sera were tested for antibodies in a sensitive antigenbinding assay (Luminex) with single class II alleles. Their reactivity was analyzed with HLAMatchmaker, a structural matching algorithm that considers so-called eplets to define epitopes recognized by antibodies. Only 24% of the patients showed donor-specific anti-DRB1 antibodies and there was a significant correlation with a low number of mismatched DRB1 eplets. This low detection rate of anti-DRB1 antibodies may also be due to allograft absorption. In contrast, antibodies to DRB3/4/5 mismatches were more common. Especially, 83% of the DRB4 (DR53) mismatches resulted in detectable antibodies against an eplet uniquely found on DR53 antigens. Donor-specific DQB mismatches led to detectable anti-DQB antibodies with a frequency of 87%. Their specificity correlated with eplets uniquely found on DQ1-4. The incidence of antibodies induced by 2-digit DQA mismatches was 64% and several eplets appeared to play a dominant role. These findings suggest that both α and β chains of HLA-DQ heterodimers have immunogenic epitopes that can elicit specific antibodies. About one-third of the sera had anti-DP antibodies; they reacted primarily with two DPB eplets and an allelic pair of DPA eplets.These data demonstrate that HLA class II reactive sera display distinct specificity patterns associated with structurally defined epitopes on different HLA-D alleles.

show abstract

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Retransplant candidates have donor-specific antibodies that react with structurally defined HLA-DR,DQ,DP epitopes

Duquesnoy

Awadalla

Lomago

et al. 2008

Transplant Immunology

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Метод LUMINEX в сравнении с ELISA является более чувствительным, позволяя выявить низкие уровни АТ к HLA. Огром-ный спектр частых и более редких HLA аллелей для всех 11 HLA локусов (А, В, С, DRB1, DRB3, DRB4, DRB5, DQA1, DQB1, DPBA1 и DPB1), сорбиро-ванных на микросферах в анализе на платформе LUMINEX, позволяет более точно определить АТ к HLA, присутствующие в сыворотке [11,13,14,33,34]. Наше исследование полностью согласуется с этими представлениями.…”

Section: Discussionunclassified

“…В твердофазном иммунолюминесцентном анализе на платформе LUMINEX смесь очищенных антигенов гистосов-местимости иммобилизирована на полистироловых микросферах [11][12][13][14].…”

Section: Introductionunclassified

Comparison of Different Methods of Anti-Hla Antibodies Detection in Diagnosis of Antibody-Mediated Renal Allograft Rejection

Иванова

Столяревич

Гичкун

et al. 2016

RJTAO

View full text Add to dashboard Cite

1 ФГБУ «Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова» Минздрава России, Москва, Российская Федерация 2 ГБУЗ «Городская клиническая больница № 52 Департамента здравоохранения г. Москвы», Московский городской нефрологический центр, Москва, Российская Федерация 3 Кафедра нефрологии ФПДО ФГБОУ ВО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова», Москва, Российская Федерация Цель исследования: оценка возможности скринингового выявления антител (АТ) к HLA I и II классов в сочетании с морфологическими и иммуногистохимическими методами для диагностики гуморального отторжения трансплантата и сравнение полученных данных в зависимости от применяемого метода оп-ределения АТ к HLA (ELISA и LUMINEX). Материалы и методы. Проанализированы данные 192 паци-ентов с дисфункцией почечного трансплантата, которым была выполнена биопсия трансплантата (c оп-ределением С4d) и исследованы АТ к HLA (у 109 пациентов методом ELISA, у 58 -методом LUMINEX, у 25 пациентов -и ELISA, и LUMINEX). На основании морфологического диагноза пациенты были разделены на 3 группы: 85 пациентов с хроническим отторжением трансплантата (ХОТ), 39 пациентов с острым гуморальным отторжением трансплантата (ОГО), 68 пациентов с иной патологией трансплантата (группа контроля). Результаты. АТ к HLA определялись у 84,7% пациентов с ХОТ, 84,6% пациентов с ОГО и у 33,8% (р < 0,001) в контрольной группе, причем резко доминировали АТ к HLA II класса. Меж-ду уровнем антител, выявляемых различными методами, определялась тесная корреляция (r² для АТ к HLA I класса составил 0,773, для АТ к HLA II класса -0,379, р < 0,01). Однако при применении метода LUMINEX АТ к HLA выявлялись чаще во всех группах, что свидетельствует о большей его чувствитель-ности. Особенно это значимо для диагностики C4d-негативного острого отторжения, частота которого составила 22,2% при LUMINEX vs. 4,8% при использовании метода ELISA. С другой стороны, АТ к HLA методом LUMINEX выявлялись у 55% пациентов контрольной группы, что требовало определения их донорспецифичности. Заключение. При наличии характерной морфологической картины и экспрессии С4d-фрагмента комплемента скрининговое определение АТ к HLA (методами ELISA, LUMINEX) явля-ется достаточным для диагностики гуморального отторжения. Однако в некоторых случаях необходимо применение более специфичных методов диагностики.Ключевые слова: АТ к HLA, С4d-компонент комплемента, антитело-опосредованное отторжение, трансплантационная гломерулопатия.

show abstract

“…In contrast, single antigen beads (SABs) are coated with a single HLA allele. For the most part, each allelic protein is purified from a cell line that does not express its own HLA antigens but will upon transfection with a single HLA gene via recombinant DNA technology (53). The isolated HLA antigens are typically recombinant proteins, not native HLA antigens.…”

Section: Theory Versus Realitymentioning

confidence: 99%

HLA Antibody Detection With Solid Phase Assays: Great Expectations or Expectations Too Great?

Gebel

Bray

2014

American Journal of Transplantation

135

101

View full text Add to dashboard Cite

Alloantibodies directed against HLA antigens, are a barrier to long-term solid organ allograft survival. The clinical impact of preformed, donor-directed HLA alloantibodies range from acceptable risk to unequivocal contraindication for organ transplantation. HLA antibodies are key factors that limit patient access to donor organs. Serological methods were once the only approach to identify HLA antigens and antibodies. Limitations in these technologies led to the development of solid phase approaches. In the early 1990s, the development of the polymerase chain reaction enabled DNA-based HLA antigen testing to be performed. By the mid-1990s, microparticle-based technology that utilized flow cytometry for analysis was developed to detect both classes I and II HLA antibodies. These methodologies revolutionized clinical histocompatibility testing. The strengths and weaknesses of these assays are described in detail in this review.

show abstract

Single human leukocyte antigen flow cytometry beads for accurate identification of human leukocyte antigen antibody specificities

Cited by 374 publications

References 15 publications

Retransplant candidates have donor-specific antibodies that react with structurally defined HLA-DR,DQ,DP epitopes

Retransplant candidates have donor-specific antibodies that react with structurally defined HLA-DR,DQ,DP epitopes

Comparison of Different Methods of Anti-Hla Antibodies Detection in Diagnosis of Antibody-Mediated Renal Allograft Rejection

HLA Antibody Detection With Solid Phase Assays: Great Expectations or Expectations Too Great?

Contact Info

Product

Resources

About