RESUMO -A mastite é um dos fatores que mais gera prejuízos à produção e industrialização do leite. O objetivo deste trabalho foi isolar a espécie Staphylococcus aureus das amostras de leite provenientes de 63 animais portadores de mastite, e verificar o seu perfil de sensibilidade antimicrobiana aos antibióticos comerciais e ao extrato de própolis à 30%. Dos 63 animais avaliados, 38 (60,32%) apresentaram crescimento de Staphylococcus aureus. Quanto ao teste de sensibilidade antimicrobiana, os antibióticos mais eficientes foram gentamicina (10 g), cefalexina (30 g) e ciprofloxacina (10 µg) com 100% de eficácia, seguida de norfloxacina (94,6%). Houve 35 (92,10%) animais com sensibilidade ao extrato alcoólico de própolis a 30%, com diâmetros de inibição entre 6 e 18 mm frente a volumes de 40L e 60 L. A investigação da sensibilidade antimicrobiana in vitro para cepas de Staphylococcus aureus isoladas de mastite bovina é de grande importância antes da indicação do seu tratamento terapêutico. O uso do extrato alcoólico de própolis a 30% na terapia antimicrobiana pode ser uma alternativa, pois seus componentes conferem-lhe grande valor na medicina natural popular e preventiva.Palavras-Chave: Antibiótico, mastite clínica, mastite subclínica, resistência.ABSTRACT -Mastitis is one of the factors that cause damage to production and processing milk. The aim of this study was to isolate the species Staphylococcus aureus from milk samples from 63 animals with mastitis, and check your profile antimicrobial sensitivity to antibiotics and the extract of propolis at 30%. Of 63 animals evaluated, 38 (60.32%) showed growth of Staphylococcus aureus. As for testing of antimicrobial sensitivity test, the most efficient antibiotics were gentamicin (10 g), cephalexin (30 g) and ciprofloxacin (10 g) with 100% efficiency, followed by norfloxacin (94.6%). There were 35 (92.10%) animals with sensitivity to the extract of propolis 30% with inhibition diameters between 6 and 18 mm in 40 L and 60 L. The investigation of in vitro antimicrobial susceptibility to Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis is extremely valuable to their treatment. The use of extract of propolis 30% in the antimicrobial therapy may be an alternative, because its components gives it excellent value in natural medicine and preventive.