Teste de ELISA indireto para o diagnóstico sorológico de pitiose

Abstract

A pitiose, doença granulomatosa de eqüinos causada pelo oomiceto Pythium insidiosum, tem como característica a evolução rápida seguida de morte dos animais. Estas mortes muitas vezes são causadas por diagnósticos errôneos ou demorados quando os doentes já não respondem ao tratamento. Este trabalho teve por objetivo a padronização do ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para diagnóstico sorológico de pitiose em eqüinos e coelhos, visando a diminuição de erros e de tempo necessário para o diagnóstico. Para o desenvolvimento e validação do teste foram utilizadas 72 amostras de soro de eqüinos saudáveis e 44 soros de eqüinos com pitiose confirmada. Os resultados da validação do ELISA para eqüinos foram: sensibilidade 97,72%, especificidade 90,27%, valor preditivo positivo 86%, valor preditivo negativo 98,4% e eficiência de 93,1%. Para coelhos, o teste foi padronizado com 48 amostras de soro de animais saudáveis e 24 amostras de coelhos imunizados com antígenos de P. insidiosum. Os resultados foram: sensibilidade 91,66%, especificidade 95,83%, valor preditivo positivo 91,66%, valor preditivo negativo 95,83% e eficiência de 94,44%. Os resultados deste trabalho demonstram que o ensaio imunoenzimático indireto é um método seguro e eficaz para o diagnóstico sorológico da pitiose.

Pitiose em animais de produção no Pantanal Matogrossense

“…Amostras sorológicas dos animais acometidos foram testadas para anticorpos especíϐicos anti-Pythium pelo ensaio imunoenzimático indireto em fase sólida, no LAPEMI (Santurio et al 2006b). …”

“…Isolamento e identiϐicação do microrganismo (Lacaz et al 2002) nem sempre apresenta êxito. A identiϐicação precoce da doença, no entanto, é diϐícil através desses métodos, mas a sorologia por ELISA apresenta boas sensibilidade e especiϐicidade (Lacaz et al 2002, Santurio et al 2006b, Dial 2007. Imuno-histoquími-ca e reação em cadeia de polimerase podem ser utilizadas em tecidos apropriadamente preservados (Rodrigues et al 2006, Dial 2007, Gabriel et al 2008.…”

Surto de pitiose cutânea em bovinos

“…Para o isolamento de P. insidiosum, pequenos fragmentos do tecido fresco, previamente lavados em solução de antibióticos e água destilada estéril, foram semeados em tubos contendo caldo Sabouraud, agar Meio Mínimo e Corn Meal agar, permanecendo incubados a 37ºC, por 24-48 horas. O teste de ELISA indireto foi realizado conforme Santurio et al (2006b).…”

Desenvolvimento e avaliação de um teste ELISA indireto para o diagnóstico sorológico do mormo em equídeos

“…Valor semelhante também foi observado por Santurio et al (2006) que padronizaram um ELISA indireto (ELISA-i) para o diagnóstico da pitiose equina e utilizaram 1mg/mL, contudo, Dantas (2004) ao padronizar um ELISA indireto para Maedi-Visna utilizou concentração de 0,5mg/mL e conseguiu obter resultados satisfatórios em sua pesquisa.…”

“…Valores semelhantes também foram encontrados por Médici, Alϐieri & Alϐieri (2000) que estudaram 983 soros bovinos para avaliar um ELISA comercial para o diagnóstico do Herpesvírus Bovino tipo 1 (HBV-1) e encontraram 100% de sensibilidade e 94,88% de especiϐicidade. Santurio et al (2006) também estudaram 116 soros de equinos para padronização de ELISA-i para pitiose e encontraram 97,72% de sensibilidade e 90,27% de especiϐicidade. Semelhança com os valores obtidos neste estudo também foi veriϐicado por Paredes et al (1999) que ao analisaram 937 amostras de soro suíno para a padronização de um ELISA-i para peste mormo em equídeos no Brasil.…”