The Ca2(+)-sensitive cytosolic phospholipase A2 is a 100-kDa protein in human monoblast U937 cells.

Kramer, Ruth M.; Roberts, Ε. H.; Manetta, Joseph; Putnam, J E

doi:10.1016/s0021-9258(19)67782-3

Cited by 394 publications

(55 citation statements)

References 27 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…In addition, a group IV cytosolic calcium-dependent PLA 2 (cPLA 2 ) was originally discovered and characterized biochemically from the macrophage cell line RAW 264.7 (7). Subsequently, it was isolated, cloned, and sequenced from the human monocytic cell line U937 (8)(9)(10). The cDNA sequence of cPLA 2 has also been determined from rat (11), mouse (9), chicken, and zebra fish (12).…”

mentioning

confidence: 99%

Purification, characterization, and cDNA sequencing of cytosolic phospholipase A2 from equine neutrophils

Forsell

Lindberg

Karlsson

et al. 2000

Journal of Lipid Research

View full text Add to dashboard Cite

It has been demonstrated that equine neutrophils, but not eosinophils, require exogenous arachidonic acid for calcium ionophore A23187-induced leukotriene synthesis. Because cytosolic phospholipase A 2 (cPLA 2 ) plays an essential role in leukotriene formation in leukocytes, we investigated the presence of a functional cPLA 2 in equine neutrophils. To determine whether cPLA 2 from neutrophils was catalytically active, we purified the enzyme Ͼ 6,500 fold with 3% recovery from equine neutrophils. The full-length cDNA sequence encoded a 749-amino acid protein. The deduced amino acid sequence demonstrated 95% identity with human and mouse cPLA 2 , as well as 83 and 73% identity with chicken and zebra fish cPLA 2 protein, respectively. The equine cPLA 2 possessed some properties that distinguished the equine enzyme from the human enzyme. First, the enzyme activity of the equine cPLA 2 was differently influenced by cations as compared with the human cPLA 2 . Second, the equine neutrophil cPLA 2 migrated as an approximately 105-kDa protein, in comparison with human cPLA 2 which migrated as a 110-kDa protein. A difference between equine neutrophils and eosinophils in the degree of phosphorylation of the cPLA 2 protein was observed. Thus, the cPLA 2 protein from eosinophils was constitutively phosphorylated, while the cPLA 2 protein from neutrophils was unphosphorylated.In summary, these results demonstrate that equine neutrophils indeed express an active cPLA 2 protein but that there is a difference in the degree of phosphorylation of the cPLA 2 protein between equine neutrophils and eosinophils. This difference might explain the difference between the two cell types in the capacity to produce leukotrienes from endogenous substrate.

show abstract

mentioning

confidence: 99%

Purification, characterization, and cDNA sequencing of cytosolic phospholipase A2 from equine neutrophils

Forsell

Lindberg

Karlsson

et al. 2000

Journal of Lipid Research

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Μια μορφή της PLA 2 μεγάλου μοριακού βάρους, η οποία υπάρχει στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων καθαρίστηκε από ομάδες επιστημόνων, καταλύει την εκλεκτική απελευθέρωση αραχιδονικού από φωσφολιποειδή και υδρολύει τα λιπαρά οξέα απο την πρόδρομη ένωση του PAF αλκυλογλυκεροφωσφοχολίνη προς σχηματισμό λυσο-PAF. 47,48,49 Αυτή η πρωτοπλασματική PLA 2 είναι μια πρωτεΐνη 110 kDa η οποία, παρουσία υπομικρογραμμομοριακών συγκεντρώσεων ασβεστίου, μετατοπίζεται προς τις κυτταρικές μεμβράνες όπου είναι καταλυτικά ενεργή. 47,49,50,51 Αυτό το χαρακτηριστικό είναι ιδιαίτερα σημαντικό αφού η ενεργοποίηση του ενζύμου από την εξάρτηση ασβεστίου βρίσκεται στην ίδια περιοχή όπως οι μεταβολές των ενδοκυτταρικών συγκεντρώσεων ασβεστίου οι οποίες πραγματοποιούνται σε απάντηση της ενεργοποίησης του κυττάρου (για παράδειγμα κατά την αντίδραση της σύνδεσης μιας ορμόνης με τον υποδοχέα της στην επιφάνεια του κυττάρου).…”

Section: σύνθεση του Pafunclassified

“…47,48,49 Αυτή η πρωτοπλασματική PLA 2 είναι μια πρωτεΐνη 110 kDa η οποία, παρουσία υπομικρογραμμομοριακών συγκεντρώσεων ασβεστίου, μετατοπίζεται προς τις κυτταρικές μεμβράνες όπου είναι καταλυτικά ενεργή. 47,49,50,51 Αυτό το χαρακτηριστικό είναι ιδιαίτερα σημαντικό αφού η ενεργοποίηση του ενζύμου από την εξάρτηση ασβεστίου βρίσκεται στην ίδια περιοχή όπως οι μεταβολές των ενδοκυτταρικών συγκεντρώσεων ασβεστίου οι οποίες πραγματοποιούνται σε απάντηση της ενεργοποίησης του κυττάρου (για παράδειγμα κατά την αντίδραση της σύνδεσης μιας ορμόνης με τον υποδοχέα της στην επιφάνεια του κυττάρου). 47,52,53 Επιπλέον, άλλες πλευρές της ρύθμισης αυτής της PLA 2 είναι σύμφωνες με αυτό που εξάγεται ως συμπέρασμα από πλήθος κυτταρικών βιολογικών μελετών πριν από τη μοριακή της ταυτοποίηση.…”

Section: σύνθεση του Pafunclassified

“…Η cPLA 2 υδρολύει κατά προτίμηση φωσφολιποειδή με πολυακόρεστα λιπαρά οξέα μακριάς αλυσίδας στην sn-2 θέση. 47,49 Επομένως, η ενεργοποίησή της καταλήγει στην εκλεκτική, αν και οχι ειδική, απελευθέρωση του αραχιδονικού οξέος με τον επιπλέον σχηματισμό της άμεσης πρόδρομης ένωσης για τον PAF (Σχ. 2.3).…”

Section: 2unclassified

See 1 more Smart Citation

Απομόνωση Λιποειδών Τροφίμων Με Βιολογική Δραστικότητα Ως Προς Τον PAF Και Μελέτη Της Δομής Του

Σεμιδαλάς¹

View full text Add to dashboard Cite

Στην γυναίκα μου Δήμητρα και το γιό μου Εμμανουήλ.iv ΠΡΟΛΟΓΟΣ Η παρούσα εργασία εκπονήθηκε στο τμήμα Χημείας του Πανεπιστημίου Αθηνών κατά την περίοδο 1994-2002 σε δύο περιόδους. Κατά την πρώτη, απομονώθηκαν στο Εργαστήριο Χημείας Τροφίμων λιποειδή από φυτικά και ζωικά τρόφιμα και εξετάστηκε η βιολογική των δραστικότητα ως προς τον παράγοντα ενεργοποίησης αιμοπεταλίων (PAF).Κατά τη δεύτερη, μελετήθηκε στο Εργαστήριο Φυσικοχημείας με πειράματα διαφορικής θερμιδομετρίας σαρώσεως (DSC), φασματοσκοπίας Raman, οπτικής μικροσκοπίας και περιθλάσεως ακτίνων Χ, η δομή του μορίου PAF.Θέλω να εκφράσω τις θερμές μου ευχαριστίες στον Καθηγητή κ. Κωνσταντίνο Δημόπουλο που ήταν υπεύθυνος για την παρούσα διατριβή αλλά και για την επίβλεψη, καθοδήγηση και βοήθεια που μου παρείχε απρόσκοπτα σε ολη τη περίοδο διεξαγωγής των βιολογικών πειραμάτων στο Εργαστήριο Χημείας Τροφίμων. Ασφαλώς, δίχως τη δική του σημαντική συμβολή θα ήταν αδύνατη η εκπόνηση και η όσο το δυνατόν πληρέστερη εμφάνιση της παρούσης διατριβής.Τον Καθηγητή κ. Αριστείδη Μαυρίδη ευχαριστώ πολύ, διότι μου παρείχε τη δυνατότητα να εργαστώ και στο Εργαστήριο Φυσικοχημείας, στηρίζοντας την προσπάθειά μου δίνοντάς μου την αναγκαία υλική υποδομή καθώς και τη συμμετοχή του στη τριμελή επιτροπή.Στον Αναπληρωτή Καθηγητή κ. Κυριάκο Βύρα θέλω να εκφράσω θερμότατες ευχαριστίες, διότι με βοήθησε αποτελεσματικά με σημαντικότατες υποδείξεις κατά τη διεξαγωγή των πειραμάτων θερμικής αναλύσεως και φασματοσκοπίας Raman.Επίσης ευχαριστώ θερμά και τον Αναπληρωτή καθηγητή κ. Θεόδωρο Καλογεράκο ως μέλος της τριμελούς εισηγητικής επιτροπής.Επίσης ευχαριστώ πολύ τα υπόλοιπα μέλη της εξεταστικής επιτροπής κ. Μ. Κουππάρη, Καθηγητή και κ. Μ. Μαυρή και Κ. Γαλανοπούλου, Επικ. Καθηγήτριες, για το χρόνο που αφιέρωσαν για την διόρθωση του κειμένου και τις χρήσιμες υποδείξεις των.Στην επίκουρο καθηγήτρια του Χαροκόπειου Πανεπιστημίου Μάγδα Αντωνοπούλου εκφράζω τις ευχαριστίες μου για τη βοήθειά της στα βιολογικά πειράματα.Στη Δρα Ζ. Σιδεράτου Ερευνήτρια του Ε.Κ.Ε.Φ.Ε. Δημόκριτος εκφράζω ευχαριστίες για την παραχώρηση του Οπτικού Μικροσκοπίου.Στον Δρα Θωμά Μαυρομούστακο, θέλω να εκφράσω τις ευχαριστίες μου για την βοήθειά του κατά τη μελέτη των ακτίνων X στο μόριο του PAF.Στον αγαπητό συνάδελφο και φίλο Σταμάτη Κουσσίση Καθηγητή στο ΤΕΙ Αθήνας θερμές ευχαριστίες για τις χρήσιμες υποδείξεις και τη συνεργασία στην όλη διεργασία αυτής της προσπάθειας.

show abstract

“…Τα αποτελέσματα αυτά ήταν σε απόλυτη συμφωνία με παλαιότερες αναφορές για την εκλεκτικότητα της GIVA cPLA 2 ως προς τα φωσφολιπίδια που φέρουν την αραχιδόνυλο λιπιδική αλυσίδα[179][180][181] . ,180,181 Από μελέτες13 C NMR που έγιναν στο σύμπλοκο cPLA 2 -AACOCF 3 με επισημασμένο13 C στην καρβονυλική θέση του αναστολέα, προέκυψε ότι η πρόσδεση στο ενεργό κέντρο του ενζύμου οδηγεί στο σχηματισμό ημιακετάλης με την σερίνη του ενεργού κέντρου, όπως συμβαίνει αντίστοιχα και με τις σερινο-πρωτεάσες179 . Γενικά φαίνεται ότι τα ένζυμα αυτά, καθώς και άλλες λιπάσες, μοιράζονται ένα κοινό μηχανισμό, που προχωρά μέσω σχηματισμού ενός ακυλο-ενζυμικού ενδιαμέσου.…”

unclassified

Σύνθεση Ενώσεων Με Ενεργοποιημένο Καρβονύλιο Που Αναστέλλουν Λιπολυτικά Ένζυμα

Μπασκάκης¹,

Baskakis²

View full text Add to dashboard Cite

Η παρούσα εργασία εκπονήθηκε στο Εργαστήριο Οργανικής Χημείας του Πανεπιστημίου Αθηνών κατά την περίοδο Νοέμβριος 2005-Δεκέμβριος 2007, υπό την επίβλεψη του Καθηγητή Γεωργίου Κόκοτου. Το θέμα της διατριβής εντάσσεται στο πλαίσιο ευρύτερης έρευνας, που αφορά στην ανάπτυξη νέων ισχυρών και εκλεκτικών αναστολέων φωσφολιπασών Α 2 . Θα ήθελα να ευχαριστήσω τον Καθηγητή κ. Γ. Κόκοτο για την ανάθεση του θέματος, την καθοδήγησή του σε όλη τη διάρκεια εκπόνησης της διατριβής και την εμπιστοσύνη που έδειξε στο πρόσωπό μου. Το αμείωτο ενδιαφέρον και η αγάπη του για την επιστημονική έρευνα αποτέλεσαν οδηγό, έμπνευση και το καλύτερο παράδειγμα για εμένα. Θα ήθελα να ευχαριστήσω επίσης θερμά τα υπόλοιπα μέλη της τριμελούς συμβουλευτικής επιτροπής, την Καθηγήτρια του Γεωπονικού Πανεπιστημίου Αθηνών Β. Κωνσταντίνου-Κόκοτου για την πολύτιμη βοήθειά της στην αποτίμηση των φασμάτων NMR και τις εύστοχες υποδείξεις της κατά τη συγγραφή της παρούσας διατριβής, όπως επίσης και την Αν. Καθηγήτρια Π. Μουτεβελή -Μηνακάκη για το ειλικρινές ενδιαφέρον σε όλη τη διάρκεια εκπόνησης της διατριβής. Θερμές ευχαριστίες θα ήθελα να εκφράσω και στα μέλη της επταμελούς εξεταστικής επιτροπής για την τιμή που μου έκαναν να αξιολογήσουν την εργασία μου. Ευχαριστώ τον Καθηγητή E. Α. Dennis και τους Dr. D. Stephens και N. Cotton του Πανεπιστημίου της Καλιφόρνιας στο San Diego των Η.Π.Α. για την διεξαγωγή των ενζυμικών πειραμάτων. Επίσης, ευχαριστώ τον Καθηγητή S. David κα την Dr. A. Kalyvas από το Ερευνητικό Ινστιτούτο του Πανεπιστημίου του McGill, στο Μόντρεαλ του Καναδά, για την διεξαγωγή των βιολογικών πειραμάτων και την άψογη συνεργασία που είχαμε. Στην διεξαγωγή αυτής της εργασίας ήταν σημαντική η συμβολή όλων των μελών του Εργαστηρίου Οργανικής Χημείας. Για το λόγο αυτό, θα ήθελα να ευχαριστήσω όλο το προσωπικό του Εργαστηρίου και τους μεταπτυχιακούς φοιτητές αυτού. Ιδιαίτερες ευχαριστίες αξίζουν στα μέλη του Εργαστηρίου του Καθηγητή Γ. Κόκοτου για την άριστη συνεργασία, συμπαράσταση και φιλικό κλίμα που είχαμε καθόλη την διάρκεια πραγματοποίησης των πειραμάτων. Δεν θα μπορούσα όμως να παραλείψω να εκφράσω τις θερμότερες ευχαριστίες μου στην Δρ. Β. Μαγκριώτη για την καθοδήγηση στην διεξαγωγή των πειραμάτων και τις ατέλειωτες ώρες επιστημονικής συζήτησης αναζητώντας λύσεις στα ερευνητικά αδιέξοδα. Η εκτίμησή μου στο πρόσωπό της και τον χαρακτήρα της είναι δεδομένη. Θα ήθελα όμως να ευχαριστήσω και την Δρ. Γ. Αντωνοπούλου όπως και την Κ. Κωνσταντίνου, για την τύχη που είχα να συνεργαστώ μαζί τους σε πολλούς τομείς της ερευνητικής διαδικασίας, βοηθώντας με πάντα χωρίς δισταγμό και δίνοντας τον καλύτερο εαυτό τους. Τέλος, ευχαριστώ την οικογένειά μου για την ενθάρρυνση, κατανόηση και την αστείρευτη καθημερινή βοήθεια που μου παρείχε. Χωρίς την δική τους στήριξη δεν θα ήταν δυνατή η πραγματοποίηση των ονείρων μου. Μπασκάκης Κωνσταντίνος Μάιος 2009 IV Ευγένεια, καλό μεν, αλλά αγαθό των προγόνων. Πλούτος δε τίμιο μεν, αλλά απόκτημα τύχης. Δόξα, σεμνό μεν, αλλά αβέβαιο. Κάλλος δε περιμάχητο, αλλά ολιγόχρονο. Υγεία, τίμιο, αλλά ευμετάστατο. Ισχύς δε ζηλευτό...

show abstract

The Ca2(+)-sensitive cytosolic phospholipase A2 is a 100-kDa protein in human monoblast U937 cells.

Cited by 394 publications

References 27 publications

Purification, characterization, and cDNA sequencing of cytosolic phospholipase A2 from equine neutrophils

Purification, characterization, and cDNA sequencing of cytosolic phospholipase A2 from equine neutrophils

Απομόνωση Λιποειδών Τροφίμων Με Βιολογική Δραστικότητα Ως Προς Τον PAF Και Μελέτη Της Δομής Του

Σύνθεση Ενώσεων Με Ενεργοποιημένο Καρβονύλιο Που Αναστέλλουν Λιπολυτικά Ένζυμα

Contact Info

Product

Resources

About