The influence of the ratio of protein and aluminum hydroxide on the manifestation of the protective properties of the recombinant fusion protein OprF-aTox-OprI Pseudomonas aeruginosa and the expression of genes of molecules of innate immunity

Abstract

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, 105064, г. Москва, Российская Федерация 2 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 117997, г. Москва, Российская Федерация РезюмеВведение. При создании вакцин, в том числе на основе рекомбинантных белков, основным показателем качества препарата является специфическая активность, или иммуногенность. На степень выраженности протективного эффекта влияют содержание в препарате антигена и адъюванта. Подбор оптимального соотношения компонентов является важным этапом при разработке производственной технологии. Влияние соотношения белка и гидроокиси алюминия оценивали по защитным свойствам и по уровню экспрессии генов сенсоров врожденного иммунитета и противомикробного пептида.Цель исследования -изучить влияние соотношения рекомбинантного белка слияния OprF-aTox-OprI и гидроокиси алюминия на проявление защитных свойств и уровень активности врожденного иммунитета, оцениваемого по экспрессии генов сенсорных рецепторов TLR4, NLRC4 и противомикробного пептида BD2 при иммунизации животных.Материал и методы. Оценку иммуногенности проводили в модели на мышах при двукратной иммунизации с двухнедельным интервалом и последующим заражением живой вирулентной культурой P. aeruginosa. Экспрессию генов оценивали методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.Результаты. Проведена оценка протективных свойств рекомбинантного белка слияния OprF-aTox-OprI в соотношениях с сорбентом 1 : 1, 1 : 2 и 1 : 3, выявлено влияние иммунизации на экспрессию макрофагами мышей генов Defb2, Tlr4, Nlrc4, Asc и Casp1. При изучении протективных свойств рекомбинантного белка с различными соотношениями белок/сорбент (1 : 1, 1 : 2 и 1 : 3) максимальный защитный эффект наблюдали при иммунизации мышей препаратом с соотношением 1 : 1. Введение вакцины влияло на экспрессию макрофагами белков TLR4, BD2, NLRC4, ASC и CASP1 и различалось по степени выраженности ответа врожденного звена иммунной системы в зависимости от рецептуры используемого препарата.Заключение. Определено оптимальное соотношение рекомбинантного белка слияния OprF-aTox-OprI с сорбентом, соответствующее значению 1 : 1.