Two-Dimensional Gel Electrophoresis Image Analysis

Caracterización de proteínas conjugadas a ubiquitina en espermatozoides humanos capacitados

“…Nuestros resultados obtenidos a partir de los SDS-PAGE mostraron que los conjugados de ubiquitina tienen mayormente un alto peso molecular debido a que una misma proteína podría estar poliubiquitinada. Si bien los análisis realizados mediante SDS-PAGE arrojaron información relevante para conocer la dinámica de ubiquitinación de proteínas en espermatozoides humanos durante la capacitación, la separación de proteínas mediante 2DE permitió analizar gran cantidad de proteínas en un solo gel, con una mejor resolución que permite caracterizar isoformas y variantes de una proteína con diferentes modificaciones posttraduccionales (Robotti et al, 2021). El uso de la técnica de 2DE nos permitió estimar el punto isoeléctrico y peso molecular de las proteínas ubiquitinadas presentes en el lisado de espermatozoides y con esto comparar el perfil de ubiquitinación entre espermatozoides CAP y NC, identificándose 6 grupos de proteínas diferencialmente ubiquitinadas (aumentó en 4 grupos de proteínas y disminuyó en 2), indicando que la capacitación espermática produce una dinámica de ubiquitinación y degradación de proteínas que es específica para cada proteína.…”