Une toxine botulique de type A modulaire et non pathogène

Abstract

> La toxine botulique de type A est l'un des poisons les plus puissants connus à ce jour. Elle agit en bloquant la libé-ration de neurotransmetteurs et son action au niveau des jonctions neuromusculaires cause une paralysie flasque pouvant causer la mort par asphyxie à fortes doses. Utilisation des protéines SNARE comme modules d'assemblageLes protéines SNARE sont impliquées dans les phénomènes de fusion membranaire [5,11,12]. L'interaction de quatre domaines SNARE aboutit à la formation d'un complexe hétéroméri-que qui joue un rôle essentiel dans les phénomènes de fusion [6]. Dans le cas des neurones, les complexes SNARE sont formés de trois protéines : SNAP-25, qui a deux domaines SNARE, la syntaxine et la synaptobrévine, qui ont chacune un domaine SNARE. Bien qu'in vivo le complexe SNARE soit dissocié par une ATPase, il est caractérisé, in vitro, par sa stabilité et sa résistance à des agents dénaturants forts tels que l'urée ou des détergents comme le SDS [7]. Ces propriétés exceptionnelles nous ont conduits à utiliser les domaines SNARE comme modules d'assemblage. Nous avons démontré leur efficacité dans cette stratégie en liant de manière stable une enzyme, la glutathion S transférase (GST), fusionnée à la synaptobrévine, à une surface portant une syntaxine, en présence de SNAP25 [8]. Il a par la suite été possible d'utiliser ces modules d'assemblage pour rassembler des unités fonctionnelles de protéines.