Objetivo: Investigar o conhecimento dos estudantes de medicina sobre a profilaxia pré-exposição (PrEP) ao HIV. Metodologia: Realizou-se uma análise com as respostas de 290 estudantes da Universidade de Vassouras, no estado do Rio de Janeiro, matriculados nos períodos do primeiro ao décimo segundo. As respostas foram coletadas durante o segundo período letivo de 2023, através de um formulário eletrônico com 12 perguntas, disponibilizado via Google Forms, acompanhado de Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. O projeto foi previamente submetido à Plataforma Brasil e ao comitê de ética institucional, obtendo aprovação sob o parecer 5.966.511. Resultados: Analisando o rendimento de acordo com o ciclo acadêmico, no ciclo básico dos 127 participantes, 62,2% deles possui 50% de acertos. O ciclo clínico com 133 respostas apresentou 66,91% com nível de acerto inferior a 50%. Já dos 30 participantes do internato, 66,67% acertaram <50%. Conclusão: A partir do exposto, é possível observar que a maioria das respostas por grupos específicos obtiveram um rendimento inferior a 50% de acertos. Diante disso, é evidente a necessidade de implementar medidas adicionais para abordar as lacunas identificadas, como a inclusão de aulas específicas sobre a PrEP no currículo obrigatório do curso de medicina, bem como a realização regular de eventos voluntários para reforçar a importância e consolidar o conhecimento sobre o assunto. Todavia, devido à escassez de estudos nessa área, é desafiador determinar uma taxa de acertos ideal. Portanto, espera-se que este estudo possa orientar o desenvolvimento de estratégias para aprimorar o conhecimento dos acadêmicos sobre as PrEPs.