A Highly Specific Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the Detection of Cry1Ac Insecticidal Crystal Protein in Transgenic WideStrike Cotton

Shan, Guomin; Embrey, Shawna K.; Schafer, Barry W.

doi:10.1021/jf070664t

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“…Numerous techniques have been proposed for identification and classification of GM organisms, such as polymerase chain reaction (PCR)56, enzyme-linked immune sorbent assay (ELISA)78, microarrays910, electrophoresis1112, biosensors13, chips14, mass spectrometry15 and chromatographic protein profiles16. However, most of these methods are destructive, time consuming, costly, difficult operations, and impossible for rapid on-site measurements.…”

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confidence: 99%

Discrimination of transgenic soybean seeds by terahertz spectroscopy

Liu

Chen

et al. 2016

Sci Rep

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Discrimination of genetically modified organisms is increasingly demanded by legislation and consumers worldwide. The feasibility of a non-destructive discrimination of glyphosate-resistant and conventional soybean seeds and their hybrid descendants was examined by terahertz time-domain spectroscopy system combined with chemometrics. Principal component analysis (PCA), least squares-support vector machines (LS-SVM) and PCA-back propagation neural network (PCA-BPNN) models with the first and second derivative and standard normal variate (SNV) transformation pre-treatments were applied to classify soybean seeds based on genotype. Results demonstrated clear differences among glyphosate-resistant, hybrid descendants and conventional non-transformed soybean seeds could easily be visualized with an excellent classification (accuracy was 88.33% in validation set) using the LS-SVM and the spectra with SNV pre-treatment. The results indicated that THz spectroscopy techniques together with chemometrics would be a promising technique to distinguish transgenic soybean seeds from non-transformed seeds with high efficiency and without any major sample preparation.

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confidence: 99%

Discrimination of transgenic soybean seeds by terahertz spectroscopy

Liu

Chen

et al. 2016

Sci Rep

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“…Para la proteína Cry1Ac se obtuvieron R 2 superiores a 0.99, lo mismo para la proteína Cry2Ab. Los valores de R 2 recomendados para asegurar la linealidad del método es ≥0.99, concordando con los resultados obtenidos por Shan et al (2007), en la construcción de curvas para la cuantificación de la proteína Cry1Ac en distintos tejidos de algodonero. En la Figura 1 se muestra las linealidades del sistema de la curva de calibración para las proteínas Cry1Ac y Cry2Ab.…”

Section: Parámetros De Calidad En Elisaunclassified

Metodologías para el análisis de expresión y cuantificación de proteínas conferidas en tejidos de cultivos GM

Verdugo-Fuentes

Espinoza

Gutiérrez-Coronado

et al. 2019

Remexca

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Las toxinas Cry de Bacillus thuringiensis (Bt) son utilizadas como bioinsecticidas en la agricultura. Se precisa de métodos confiables que permitan analizar las características que se confieren a las plantas genéticamente modificadas (GM) durante su desarrollo, antes de su comercialización. El objetivo del trabajo fue estandarizar metodologías para el análisis de la expresión de genes y proteínas conferidas al algodonero GM durante sus diferentes etapas fenológicas en campo. Como principal aplicación práctica del estudio realizado, las metodologías estandarizadas se podrán emplear en la caracterización de cultivos GM que se desarrollen y para los cuales sea necesario realizar su análisis de riesgo. Para ello se procesaron muestras de tejido vegetal en diferentes etapas fenológicas obtenidas de predios comerciales de algodonero GM en el Valle del Yaqui. En los diferentes tejidos se cuantificó la expresión génica y proteica mediante análisis RTq-PCR y Elisa, respectivamente. Los resultados obtenidos muestran variación en la expresión de los genes conferidos a lo largo del desarrollo de la misma variedad y entre los diferentes sitios donde se ubicaron los cultivos. Los mayores niveles de expresión se identificaron, como se esperaba, en las etapas tempranas del cultivo (valores medios de 8.5 μg g-1 para Cry1Ac y 63.1 μg g-1 para Cry2Ab) comparados con lo observado en etapas tardías o maduras (valores medios de 0.05 y 0.3 μg g-1 para Cry1Ac y Cry2Ab, respectivamente). Por lo tanto, se concluye que las técnicas de RTq-PCR y ELISA son adecuadas para evaluar la expresión espacial y temporal de genes que se confieran a plantas GM, información requerida para caracterizar la exposición al peligro y poder realizar el análisis de riesgo.

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“…Cry1F, Cry1Ac (full-length and truncated forms), Cry1Ab, Cry34Ab1, Cry35Ab1, BAR, and PAT (Shan et al, 2007). In addition, if the protein is known to be closely related to an endogenous protein or proteins, an understanding of the level of crossreactivity with the endogenous counterpart(s) is relevant.…”

Section: Cross-reactivity/interference Of Purified Proteinsmentioning

confidence: 99%

“…A difference of 15% or more for each point on the standard curve has been applied in a recent method validation study (Shan et al, 2007). Criteria for determining whether the matrix effects are significant can vary and may depend, in part, on the expected precision of the standard curve.…”

Section: Cross-reactivity/interference Of Matrixmentioning

confidence: 99%