A New Method to Determine Natural Killer Cell Activity Without Target Cells

Abstract

Natural killer (NK) cell activity is a conventional parameter used to determine the performance lytic activity against tumor as well as virus-infected cells in innate immunity. However, use of this parameter has several problems related to bioassay measurements. To measure NK cell activity, target cells and cell culture equipment are required and adequate pre-culture of target cells is needed to maintain constant sensitivity for NK cells. NK cell-activating receptors play an important role in the recognition of targets, which transduce the signals necessary for cellular machinery to induce target injury and cytokine production. We statistically examined the parameters related to the NK cell activity of human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) by multiple regression analysis, and obtained a formula with NK cell % and RNA levels of two genes in isolated NK cells. The score calculated using this formula with the three measured values showed significant correlation with NK cell activity. This prediction score, named the non-incubating natural killer (NINK) score, which is independent of target cells, is not affected by inappropriate preparation of those targets, and allows us to accurately compare the performance of NK cell activity among specimens.

Hubungan antara Kendali Glikemik pada Pasien Diabetes Melitus Tipe 2 dengan Aktivitas Sel Natural Killer

“…Metode ini mengharuskan peneliti menggunakan sel target yang dilabel dengan radioisotop 51 Cr untuk menghitung jumlah radioisotop yang dikeluarkan oleh sel target yang dilisis oleh sel NK. 18 Dengan adanya teknik flow cytometry, kemudian dikembangkan metode alternatif yang lebih sederhana tanpa menggunakan sel target, antara lain pengukuran ekspresi lysosomeassociated membrane protein-1 (LAMP-1), ekspresi NKG 2 D dan NK p46 , peningkatan ekspresi CD56, atau pengukuran ekspresi CD69. 11,[18][19][20] Pada penelitian kami dilakukan pengukuran aktivitas sel NK dengan mengukur ekspresi CD69 dan CD56.…”

“…18 Dengan adanya teknik flow cytometry, kemudian dikembangkan metode alternatif yang lebih sederhana tanpa menggunakan sel target, antara lain pengukuran ekspresi lysosomeassociated membrane protein-1 (LAMP-1), ekspresi NKG 2 D dan NK p46 , peningkatan ekspresi CD56, atau pengukuran ekspresi CD69. 11,[18][19][20] Pada penelitian kami dilakukan pengukuran aktivitas sel NK dengan mengukur ekspresi CD69 dan CD56. Metode ini dipilih karena lebih sederhana, lebih murah, tanpa melibatkan proses stimulasi sel NK dengan K562 cell line, dan telah dibuktikan memiliki kesetaraan dengan metode standar CRA (r=0,765; nilai p <0,001).…”