Actividad antifúngica de extractos de biomasa celular de neem sobre aislamientos de dermatofitos

Abstract

ResumenLas líneas celulares de neem (Azadirachta indica A. Juss.) cultivadas en suspensión líquida han demostrado producir metabolitos secundarios bioactivos, particularmente triterpenoides. En consecuencia, se han realizado estudios para el control de microorganismos de importancia médica, como los hongos dermatofitos. El objetivo principal de este trabajo fue evaluar a través de un método de referencia in vitro la actividad antifúngica de diferentes extractos de cultivos celulares de neem sobre varios aislamientos de Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum y Epidermophyton floccosum. Se realizó un escalado de cultivos de suspensiones celulares de neem, a partir de los cuales se obtuvo un extracto crudo metanólico. Éste extracto fue fraccionado posteriormente por cromatografía en columna de silica gel. Con los extractos obtenidos se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI), siguiendo el método de microdilución en caldo M38-A2, con cinco aislamientos de T. mentagrophytes, cinco de T. rubrum y tres de E. floccosum. Se usó como control positivo el antimicótico Terbinafina. Los resultados mostraron que el extracto crudo de biomasa celular de neem inhibe el crecimiento hasta en 100 % de T. mentagrophytes, T. rubrum y E. floccosum. Al evaluar las fracciones por separado, se observó que las de menor polaridad exhibieron en general mayor actividad antifúngica (CMI=109 µg/mL) que el extracto crudo per se (CMI=2500 µg/ mL) y las fracciones más polares (CMI=7000 µg/mL). Lo anterior indica que las células de neem cultivadas en suspensión producen compuestos con actividad antifúngica, siendo más bioactivos los presentes en las fracciones de menor polaridad.Palabras clave: método de microdilución en caldo, cromatografía, cultivo de células en suspensión, concentración mínima inhibitoria, compuestos bioactivos. AbstractCell lines of neem (Azadirachta indica A. Juss.) grown in liquid suspension have shown to produce bioactive secondary metabolites, particularly triterpenoids. In consequence, its use as a control of medical microorganisms (like dermatophytes) is proposed. The main goal of this study was to assess the antifungal activity of methanolic extracts from neem cultured cell suspensions on several isolates of Trichophyton mentagrophytes (five isolates), Trichophyton rubrum (five isolates) and Epidermophyton floccosum (three isolates). Neem cell suspension cultures were scaled up, from which a raw methanolic extract was obtained. This extract was fractionated by silica gel column chromatography. The raw methanolic extract and its fractions were used in order to determine the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) on the dermatophytes isolates by following M38-A2 broth microdilution method. Antimycotic Terbinafine was used as positive control. The results shown that neem raw cellular biomass extract inhibits the growth of T. mentagrophytes, T. rubrum and E. floccosum in at least 100%. In the evaluations of the separated fractions, it was observed that the low polarity fractions had higher antifungal ac...

ANTIFUNGAL ACTIVITY OF NEEM (Azadirachta indica: MELIACEAE) EXTRACTS AGAINST DERMATOPHYTES

“…The previous results indicated that there is a synergistic or additive effect of terpenoids in the methanolic extract from neem seed oil. The findings of Ospina et al (2014), are also in agreement with the prior hypothesis, considering that a non-polar fraction of a neem cultured cell extract was more effective in inhibiting the growth of dermatophytes than the raw extract per se.…”

“…It is remarkable that the MICs of leaves (50 -200 µg/mL), seed oil (650 -2500 µg/mL), and cell suspension extracts (2500 -5000 µg/mL; Ospina et al, 2014) were progressively incrementing, unlike their absorbance peaks between 14 -18 minutes were decreasing (Fig. 2).…”

“…It was registered at a wave length of 213 nm during 25 minutes (Orozco-Sanchez et al, 2011). The resultant HPLC profiles were also compared with that of a methanol extract from neem cultured cell suspensions (Ospina et al, 2014).…”