Análise enantiosseletiva de fármacos e metabólitos em matrizes biológicas empregando técnicas miniaturizadas de preparação de amostras

Albuquerque, Nayara Cristina Perez de; Bortoleto, Marcela Armelim; Oliveira, Anderson Rodrigo Moraes de

doi:10.4322/sc.2014.005

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“…A HF-LPME consiste na miniaturização da extração líquido-líquido, no entanto, suportada com uma membrana porosa. A HF-LPME vem se destacando devido a pequena geração de resíduo químico, facilidade operacional, baixo custo, boa seletividade e excelentes valores de recuperação [38,39].…”

Section: Ocas (Hf-lpme)unclassified

“…Além disso, desenvolver um sistema simples e prover uma forma de levar o sistema de extração ao local onde se encontra a amostra para a realização da extração "in situ" dos analitos de interesse [51]. A aplicabilidade da técnica vem sendo extensivamente explorada [39] e seu emprego é variado, desde determinação de poluentes em amostras ambientais como ar, água, solo; determinação de fármacos em fluidos biológicos como urina, sangue, cabelos; até mesmo na determinação de compostos aromáticos ou tóxicos presentes em alimentos [52].…”

Section: Microextração Em Fase Sólida (Spme)unclassified

“…A SPME é uma técnica muito versátil, aplicada à análise de compostos voláteis e não-voláteis, podendo ser feita por imersão direta ou por headspace [39]. Na extração direta, a fibra entra em contato com a matriz e os analitos são sorvidos na fase extratora até atingir o equilíbrio.…”

Section: Microextração Em Fase Sólida (Spme)unclassified

“…Vários fatores influenciam a extração por DLLME, como volume e tipo de solventes extrator e dispersor, pH da amostra e tempo de extração (DLLME assistida) [39].…”

Section: Microextração Líquido-líquido Dispersiva (Dllme)unclassified

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Desenvolvimento de métodos cromatográficos e eletroforéticos enantiosseletivos para análise de fármacos e praguicidas em estudos de biotransformação e metabolismo in vitro

Oliveira¹

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Section: Ocas (Hf-lpme)unclassified

Section: Microextração Em Fase Sólida (Spme)unclassified

“…Vários fatores influenciam a extração por DLLME, como volume e tipo de solventes extrator e dispersor, pH da amostra e tempo de extração (DLLME assistida) [39].…”

Section: Microextração Líquido-líquido Dispersiva (Dllme)unclassified

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Desenvolvimento de métodos cromatográficos e eletroforéticos enantiosseletivos para análise de fármacos e praguicidas em estudos de biotransformação e metabolismo in vitro

Oliveira¹

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Avaliação de fungos no metabolismo enantiosseletivo da Zopiclona e análise por eletroforese capilar

Albuquerque¹

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Zopiclone (ZO) is a chiral drug extensively metabolized into N-desmethylzopiclone (N-Des) and zopiclone-N-oxide (N-Ox). Pharmacological studies showed that the metabolite (S)-N-Des presents anxiolytic activity, which indicates that this metabolite has a potential to be used in the treatment of anxiety. An alternative way for obtaining this metabolite may be the biotransformation employing fungi as catalytic agent. Therefore, the aim of this study was to evaluate if fungi are able to biotransform ZO into its active metabolite N-Des and to verify if this process is enantioselective. To perform ZO and its metabolites analysis from liquid culture medium, an enantioselective method by capillary electrophoresis (CE) and dispersive liquid-liquid microextraction (DLLME) was developed. The CE analyses were carried out in 50 mmol L-1 sodium phosphate buffer pH 2.5 containing 0.5% (w/v) carboxymethyl-β-CD with a constant voltage of +25 kV and capillary temperature of 20ºC. The extraction conditions established for DLLME were: 2 mL of sample (pH adjusted using 2 mL of 0.1 mol L-1 tris-HCl buffer pH 9.5), chloroform (100 µL) and methanol (300 µL) as extraction and disperser solvent, respectively. Before the biotransformation study, the method was validated according to EMA and ANVISA guidelines for analysis of drug and metabolites in biological matrices. The method was linear over a concentration range of 90-6000 ng mL-1 for each ZO enantiomer (r > 0.999) and 50-1000 ng mL-1 for each N-Des enantiomer (r > 0.998); the absolute recovery was 52% for N-Des and 83% for ZO. Other parameters, such as: accuracy, precision, selectivity and stability were all in agreement with guideline. The developed method was employed in biotransformation studies using the following fungi: Penicillium crustosum, Aspergillus fumigatus, Nigrospora sphaerica (Sacc.) E.W. Mason, Fusarium oxysporum, Mucor rouxii, Cunninghamella elegans ATCC 10028B and Cunninghamella echinulata var elegans ATCC 8688A. Among all evaluated fungi, Cunninghamella elegans ATCC 10028B and Cunninghamella echinulata var elegans ATCC 8688A were able to biotransform the ZO to its active metabolite N-Des. Using the fungus Cunninghamella echinulata var. elegans ATCC 8688A, after 360 hours of incubation it was obtained a maximum concentration of ()-(R)-N-Des and (+)-(S)-N-Des of 508 ng mL-1 and 221 ng mL-1 , respectively with an enantiomeric excess of 39%. The fungus Cunninghamella elegans ATCC 10028B formed preferentially the metabolite (+)-(S)-N-Des. After 240 hours of incubation, the concentration of metabolites ()-(R)-N-Des and (+)-(S)-N-Des was 120 ng mL-1 and 228 ng mL-1 , respectively with enantiomeric excess of 35%.

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Avaliação da exposição de crianças a substâncias psicoativas durante a lactação através da análise toxicológica em leite materno

Silveira¹

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Para a realização deste trabalho contei com muito apoio e incentivo durante e mesmo antes do ingresso no mestrado, dentro e fora da universidade, portanto jamais poderia deixar de mostrar minha gratidão. Sou grata em primeiro lugar à minha mãe, Maria Cremilde, que tomou como seus os sonhos dos filhos e graças a sua luta cá estou hoje. Ao meu pai Domingos e aos meus irmãos Bianca, Igor e Isabela pela disposição e apoio incondicionais. Aos meus avós Chico, Marilene e Leônia e as minhas tias Selma e Nivalda, fiéis escudeiros de mainha, sempre atentos, preocupados e a disposição em todos os momentos. A toda minha família, formadores do que sou hoje. Agradeço a Rafael Lanaro, Paula Souhbia e Sueli Melo, por confiar, abrir portas e me incentivar a seguir. Sou grata a Bia Bismara pela transmissão de conhecimento e paciência no meu ingresso no LAT-USP, bem como a toda sua equipe, estagiários, Angelo e D. Luzia. No início senti receio de não saber se haveria uma equipe e amigos ao meu lado com os quais contar, então agradeço a Flavia Roveri e Sarah Eller por acabarem com esse receio e serem essas amigas ... e a equipe cresceu: agradeço a

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Análise enantiosseletiva de fármacos e metabólitos em matrizes biológicas empregando técnicas miniaturizadas de preparação de amostras

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