Análisis de la estructura primaria y secundaria del ARN de transferencia mitocondrial para serina en siete especies de Lutzomyia

Abstract

Introducción. Los insectos del género Lutzomyia son los responsables de la transmisión del parásito Leishmania spp. en América. La taxonomía de estos vectores se fundamenta en los caracteres morfológicos que exhiben los adultos, principalmente, en las estructuras pareadas de la cabeza y los genitales. Aunque estos caracteres permiten distinguir la mayoría de los taxones, la similitud en algunos subgéneros y grupos de especies pone límites a la identificación por criterios morfológicos. Objetivo. Evaluar la utilidad del ARN de transferencia mitocondrial para serina ARNt Ser en la determinación taxonómica de Lutzomyia. Materiales y métodos. Se analizaron siete especies flebotomíneas, L. trinidadensis, L. panamensis, L. cayennensis cayennensis, L. dubitans, L. gomezi, L. rangeliana y L. evansi. A partir de cada individuo, se extrajo, amplificó y obtuvo la secuencia del gen mitocondrial que codifica para el ARNt Ser , delimitado por los genes citocromo b y NAD deshidrogenasa uno. La estructura secundaria del ARNt Ser se infirió teniendo como base las estructuras homólogas descritas en otros insectos del orden Diptera. Resultados. La longitud del gen ARNt Ser osciló entre 66 pb en L. gomezi y 69 pb en L. trinidadensis. En el alineamiento nucleotídico de 70 posiciones, se detectaron 14 sitios polimórficos, incluyendo cuatro eventos indel. La mayoría de las sustituciones correspondieron a las lupas dihidrouridina, ribotimidina-pseudouridina-citosina y variable, así como al extremo basal del brazo anticodón. Conclusión. Los cambios en la secuencia primaria de nucleótidos y los rearreglos en la estructura secundaria del ARNt Ser son potencialmente útiles para la discriminación taxonómica de las especies flebotomíneas estudiadas.Palabras clave: Psychodidae/clasificación, ARN de transferencia/genética, mitocondria, ADN, leishmaniasis.Analysis of the primary and secondary structure of the mitochondrial serine transfer RNA in seven species of Lutzomyia Introduction. Lutzomyia sand flies are involved in the transmission of the parasite Leishmania spp. in America. The taxonomy of these vectors is traditionally based on morphological features of the adult stage, particularly the paired structures of the head and genitalia. Although these characters are useful to distinguish most species of Lutzomyia, morphological identification may be complicated by the similarities within subgenera and species group. Objective. To evaluate the utility of mitochondrial serine transfer RNA tRNA Ser for taxonomic identification of Lutzomyia. Materials and methods. Seven sand fly species, each representing one of the 27 taxonomic subdivisions in genus Lutzomyia, were analyzed including L. trinidadensis (Oswaldoi group), L. (Psychodopygus) panamensis, L.(Micropygomyia) cayennensis cayennensis, L. dubitans (Migonei group), L. (Lutzomyia) gomezi, L. rangeliana (ungrouped) and L. evansi (Verrucarum group). The mitochondrial tRNA Ser gene, flanked by the cytochrome b and NAD dehydrogenase subunit one genes, was extracted, amplified and sequenced from ...

Descripción del ARN de transferencia mitocondrial para Serina (UCN) de Lutzomyia columbiana (Diptera, Psychodidae)

“…tihuiliensis Le Pont, Torrez-Espejo & Dujardin 1997, y Lu. hartmanni (Fairchild y Hertig, 1957 (Vivero et al 2007;Pérez-Doria et al 2008). Este trabajo constituye, por lo tanto, la primera descripción de la estructura secundaria del ARNt Ser mitocondrial de Lu.…”

“…Los genes mitocondriales secuenciados a la fecha en Lutzomyia spp. son citocromo b, citocromo oxidasa I, las subunidades 1 y 4 del complejo NAD deshidrogenada, la subunidad pequeña ribosomal y el ARN mitocondrial de transferencia para serina (Ready et al 1997;Suguri et al 1997;Uribe et al 2001;Ishikawa et al 1999;Bejarano 2001;Rojas et al 2001;Arrivillaga et al 2002;Testa et al 2002;Torgerson et al 2003;Beati et al 2004;Vivero et al 2007). En años recientes el último gen ha empezado a ser valorado como marcador molecular demostrando, de forma preliminar, su utilidad en la caracterización genética y el diagnóstico de especie.…”

“…columbiana se obtuvo con el programa tRNAscan-SE 1.21 (Lowe y Eddy 1997) y se graficó manualmente. Por último, la molécula generada se comparó con la estructura secundaria del ARNt Ser de otras especies del género Lutzomyia (Pérez-Doria et al 2008;Vivero et al 2007). …”

Species of sand flies (Diptera: Psychodidae) collected from natural reserves in the Pacific and Darien regions of Colombia

“…coutinhoi, con la finalidad de confirmar su presencia en Colombia mediante un método complementario al análisis de caracteres morfológicos. El ADN se extrajo del tórax y los segmentos proximales del abdomen utilizando el protocolo de alta concentración de sales (24). El fragmento 5' del gen mitocondrial COI se amplificó con los iniciadores LCO1490 GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG y HCO2198 -TAAACTTCAGGG TGACCAAAAAATCA, en las condiciones de reacción y con el perfil térmico previamente descritos (25).…”

Phylogenetic signal at the Cytb-SertRNA-IG1-ND1 mitochondrial region in Anopheles (Kerteszia) neivai Howard, Dyar & Knab, 1913

“…In addition, the transfer RNA genes (tRNA), also present in the mitochondrial genome, have a pivotal role in protein biosynthesis (26). The critical function of these genes limits the mutations they can accommodate, which is a desirable tool for studying evolution among closely related organisms.…”