El aluminio (Al3+) es un elemento benéfico que a bajas dosis puede promover crecimiento, desarrollo y metabolismo en plantas. En esta investigación se evaluó el efecto del aluminio (Al3+) en indicadores de crecimiento (número de brotes y hojas, tamaño de brotes, largo y ancho de hojas, peso de biomasas fresca y seca) y bioquímicos [concentración de clorofilas (a, b y total), azúcares, proteínas y aminoácidos] en las variedades de caña de azúcar (Saccharum spp.) Mex 69-290 y CP 72-2086, durante la etapa de multiplicación en condiciones de cultivo in vitro. Se probaron cuatro dosis de Al3+: 0, 50, 100 y 150 μM al momento de la siembra, y las variables se midieron 30 días después de la siembra. Los datos fueron sometidos a análisis de varianza de una vía y las medias fueron comparadas con la prueba de Tukey (P ≤ 0.05). La aplicación de 100 μM Al3+ en la variedad CP 72-2086 aumentó el largo y ancho de hojas, número de hojas y brotes, concentración de clorofilas a y b, azúcares, proteínas y aminoácidos. El tratamiento con 50 μM Al3+ en la variedad Mex 69-290 presentó el mejor efecto bioestimulante al incrementar el número de hojas y brotes, el largo y ancho de hojas, clorofila a y azúcares totales. El Al3+ tuvo un efecto bioestimulante al mejorar indicadores de crecimiento y bioquímicos de las variedades Mex 69-290 y CP 72-2086 cultivadas in vitro.