Analysis of conjugated and trans fatty acids after derivatization (in French)

Abstract

Fatty acid methyl esters can be prepared easily by direct acid transesterification. If conjugated fatty acids are present, soft techniques must be used. In spite of new polar phases and capillary colums, the complete separation of all the fatty acids cannot be obtained by GC. However, the utilisation of silver ion HPLC and TLC helps to resolve some of the isomers. The derivatisation of fatty acids in DMOX, picolinyl and MTA derivatives enable the determination of the double bond position by GC-MS. GC-FTIR achieved the determination of the geometrical configuration. L es isomères d'acides gras monoinsaturés sont généra-lement formés à la suite de l'hydrogénation catalytique des huiles alimentaires [1] alors que les acides gras trans polyinsaturés (AGPI) apparaissent pendant la désodo-risation ou la friture [2,3]. Ceux-ci sont principalement formés à partir de l'acide linoléique (cis-9, cis-12-18:2) Il a été récemment montré que certains isomères d'acides gras polyinsaturés pouvaient également être métabolisés par l'animal [6,7]. Les mélanges d'isomères formés sont géné-ralement complexes et nous décrirons ci-dessous les diffé-rentes méthodes utilisées qui permettent leur quantification dans les différents aliments mais aussi l'analyse structurale des métabolites présents dans les échantillons biologiques. Utilisation de différentes techniques chromatographiques pour l'analyse des esters méthyliques d'acides gras trans et conjuguésLa dérivation des acides gras en esters méthyliques est la technique la plus utilisée pour l'analyse des lipides par chromatographie en phase gazeuse.Différentes méthodes sont utilisées pour la dérivation des acides gras à partir d'une matrice lipidique complexe comme les triglycérides ou les phospholipides [8]. Les esters méthy-liques sont couramment préparés par tra n s e s t é ri fi c at i o n directe des triglycérides ou des phospholipides en présence d'un catalyseur qui est soit acide (HCl, H 2 SO 4 , BF 3 dans le méthanol) soit basique (méthanolate de sodium ou de potassium). Par contre, la saponification suivie d'une estérifica-tion des acides gras libérés est, de nos jours, une méthode moins utilisée.Le choix de la méthode de méthylation repose en grande partie sur la présence d'acides gras conjugués dans l'échan-tillon. En 1972, Koritala et al. [9] ont signalé la présence d'artefacts au cours de la méthylation avec du BF 3 -métha-nol. Shantha et al. [10], qui ont étudié différentes méthodes de méthylation, ne recommandent pas l'utilisation de catalyseur acide. En effet, la transestérification en présence de c at a lyseur acide est réalisée à haute températ u re (90 à 100 °C) ce qui entraine l'isomérisation des doubles liaisons conjuguées, d'où une augmentation importante de la teneur d'isomères di-trans comme le montre la figure 1.

Derivatization in Mass Spectrometry—5. Specific Derivatization of Monofunctional Compounds

“…62,63 This technique was applied to a detailed study of conjugated fatty acids in biological samples. 64 A further derivatization approach to the determination of double bond positions involves the methoxymercurationdemercuration reaction. 65,66 The sample is heated under reflux with CH 3 OH and an excess of Hg(OCOCH 3 ) 2 followed by treatment with NaBH 4 .…”

Derivatization in Mass Spectrometry—4. Formation of Cyclic Derivatives

“…At the same time, they are of low volatility and cannot be analyzed by GC/MS. In this respect, adducts with 4-methyl-1,2,4-triazoline-2,5-dione, having relatively low retention indices and good thermal stability, are preferred: 64,65 Their EI mass spectra are rather simple and easy to interpret (Figure 4).…”