Analysis of microtubule cytoskeleton distribution using a fluorescent taxoid in two trichomonadid protozoa: Trichomonas gallinae and Tritrichomonas foetus

Vieira, Patrícia B.; Borges, Fernanda Pires; Gottardi, Bárbara; Stuepp, Cristiane dos Santos; Larrè, Anne Brandolt; Tasca, Tiana; Carli, Geraldo A De

doi:10.1016/j.exppara.2007.12.011

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“…In contrast, the anti-TvTUBPGlu antibody recognized A, the P–BB complex, and the undulating membrane (UM) but not F ( Figure 5 m,n,o). These recognition patterns agreed with previously reported data [ 32 , 33 , 34 , 35 , 36 , 37 , 38 , 39 , 40 ]. Goat anti-mouse secondary antibody used as a negative control showed no recognition, as expected ( Figure 5 p–t).…”

Section: Resultssupporting

confidence: 93%

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Omics Analyses of Trichomonas vaginalis Actin and Tubulin and Their Participation in Intercellular Interactions and Cytokinesis

Lorenzo-Benito

Rivera-Rivas

Sánchez-Ayala

et al. 2022

Genes

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Actin and tubulin proteins from Trichomonas vaginalis are crucial for morphogenesis and mitosis. This parasite has 10 and 11 genes coding bonafide actin and tubulin proteins, respectively. Hence, the goal of this work was to analyze these actin and tubulin genes, their expression at the mRNA and protein levels, and their parasite localization in intercellular interaction and cytokinesis. Representative bonafide actin (tvact1) and tubulin (tvtubα1) genes were cloned into and expressed in Escherichia coli. The recombinant proteins TvACT1r and TvTUBα1r were affinity purified and used as antigens to produce polyclonal antibodies. These antibodies were used in 1DE and 2DE WB and indirect immunofluorescence assays (IFA). By IFA, actin was detected as a ring on the periphery of ameboid, ovoid, and cold-induced cyst-like parasites, on pseudopods of amoeboid parasites, and in cytoplasmic extensions (filopodia) in cell–cell interactions. Tubulin was detected in the axostyle, flagellum, undulating membrane, and paradesmose during mitosis. Paradesmose was observed by IFA mainly during cytokinesis. By scanning electron microscopy, a tubulin-containing nanotubular structure similar to the tunneling nanotubes (TNTs) was also detected in the last stage of cytokinesis. In conclusion, actin and tubulin are multigene families differentially expressed that play important roles in intercellular interactions and cytokinesis.

show abstract

Section: Resultssupporting

confidence: 93%

“…By IFAs, tubulin presence has been detected in the axostyle, flagella, costa, pelta, basal body, and paradesmosa. Moreover, tubulin posttranslational modifications (PTMs), such as acetylation and polyglutamylation, have been reported [ 32 , 33 , 34 , 35 , 36 , 37 , 38 , 39 , 40 ].…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Omics Analyses of Trichomonas vaginalis Actin and Tubulin and Their Participation in Intercellular Interactions and Cytokinesis

Lorenzo-Benito

Rivera-Rivas

Sánchez-Ayala

et al. 2022

Genes

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show abstract

“…FLUTAX-2 foi gentilmente cedido pelo Dr. André A. souto (Faculdade de Química, PUcrs, Brasil). FLUTAX-2 apresenta absorbância na região UV-visível e espectro de emissão de fluorescência conforme os respectivos cromóforos (Vieira et al, 2008). Os trofozoítos cultivados por 24, 48, 72, 96 e 120 horas foram lavados três vezes com PBs e a densidade foi ajustada para 1,0x10 6 trofozoítos/mL.…”

Section: Isolamento Dos Cistosunclassified

“…FLUTAX-2 é um derivado fluorescente ativo do Taxol. esses derivados podem ser extremamente úteis em estudos sobre morfologia e mecanismos de associação e estabilização de microtúbulos (Vieira et al, 2008). FLUTAX-2 liga-se aos dímeros polimerizados de α-ß tubulina, competindo com a molécula de Taxol pelo mesmo sítio de ligação.…”

unclassified

“…A análise microscópica da distribuição dos microtúbulos e composição do citoesqueleto, por meio do uso de FLUTAX, contribui para a compreensão de aspectos envolvidos na morfologia e comportamento celular (Lecke et al, 2003). ela já foi realizada com células epiteliais Ptk2, células leucêmicas U937, Trypanosoma cruzi (Evangelio et al, 1998), Trichomonas vaginalis, Trichomonas gallinae e Tritrichomonas foetus (Lecke et al, 2002;Vieira et al, 2008).…”

unclassified

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Giardia lamblia: Distribuição de Microtúbulos no citoesqueleto de trofozoítos e cistos utilizando taxóide fluorescente

Frasson¹,

Vieira²,

Carli³

et al. 2010

Rev Patol Trop

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Giardia lamblia é um protozoário parasito do intestino delgado, agente etiológico da giardiose, o qual apresenta um complexo citoesqueleto composto por microtúbulos. Neste estudo, a distribuição dos microtúbulos no citoesqueleto de trofozoítos e cistos de G. lamblia foi investigada por meio de um taxóide fluorescente, o FLUTAX-2 -um derivado do Taxol que se liga aos dímeros polimerizados de αβ-tubulina. O efeito do metronidazol sobre o citoesqueleto do organismo também foi avaliado. FLUTAX-2 foi capaz de se ligar aos microtúbulos de trofozoítos e cistos de G. lamblia, tornando possível a visualização de estruturas do citoesqueleto do microrganismo, como flagelos, funis e disco adesivo. Além disso, FLUTAX-2 marcou os trofozoítos cultivados por diferentes períodos, revelando que o intervalo de 48 horas é o melhor tempo de cultivo. A incubação dos parasitos na presença de metronidazol não demonstrou alteração significativa na marcação microtubular por FLUTAX-2. Nosso grupo já apresentou a marcação pelo FLUTAX-2 em outros protozoários, Trichomonas vaginalis, T. gallinae e Tritrichomonas foetus, e este é o primeiro trabalho a revelar o perfil de ligação em G. lamblia. Os resultados contribuem para o conhecimento de aspectos biológicos e morfológicos do parasito e sugerem perspectivas para o diagnóstico laboratorial da giardiose.DescriTOres: FLUTAX-2, Giardia lamblia, citoesqueleto, Taxol iNTrODUÇÃO Giardia lamblia (sin. Giardia duodenalis, Giardia intestinalis) é um protozoário parasito do intestino delgado (Gardner & Hill, 2001) capaz de infectar diversos hospedeiros vertebrados, incluindo o homem (Cacciò et

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Fluorescent Taxoid Probes for Microtubule Research

Barasoaín

Díaz

Andreu

2010

Methods in Cell Biology

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Analysis of microtubule cytoskeleton distribution using a fluorescent taxoid in two trichomonadid protozoa: Trichomonas gallinae and Tritrichomonas foetus

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Omics Analyses of Trichomonas vaginalis Actin and Tubulin and Their Participation in Intercellular Interactions and Cytokinesis

Omics Analyses of Trichomonas vaginalis Actin and Tubulin and Their Participation in Intercellular Interactions and Cytokinesis

Giardia lamblia: Distribuição de Microtúbulos no citoesqueleto de trofozoítos e cistos utilizando taxóide fluorescente

Fluorescent Taxoid Probes for Microtubule Research

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