El objetivo de la presente investigación fue evaluar la influencia de las condiciones de extracción sobre los compuestos polifenólicos totales del Piper aduncum L. Las hojas de P. aduncum fueron adquiridas frescas en el mercado local de la ciudad de Puyo, ubicado en la amazonia de la provincia de Pastaza-Ecuador. Los extractos acuosos se obtuvieron aplicando la extracción asistida por ultrasonido. Se aplicó la técnica de Folin-Ciocalteu para determinar los compuestos polifenólicos totales, y la actividad antioxidante fue evaluada por los métodos FRAP y ABTS. Los factores de estudio fueron: relación sólido/líquido (5/100, 10/100 y 15/100), tiempo (10, 20 y 30 min) y temperatura (30, 45 y 60°C). Se planteó un diseño factorial 23 y se usó el software Design Expert versión 10 para el procesamiento estadístico. El valor más alto de polifenoles totales fue de 2.24 g equivalentes de ácido gálico/100 g de materia seca y las mejores condiciones de extracción fueron relación sólido/líquido: 15/100, tiempo: 30 min y temperatura: 60°C. La actividad antioxidante del extracto obtenido en las mejores condiciones, por las técnicas FRAP y ABTS fueron respectivamente 177 y 86.4 mg equivalentes a Trólox/100 g de materia seca; así mismo, los ensayos para el tamizaje fitoquímico identificaron la presencia de saponinas, alcaloides, flavonoides, taninos, aminoácidos, quinonas, triterpenos y azúcares reductores. El análisis de minerales en las hojas de P. aduncum identificó concentraciones de nitrógeno (2.07%), fósforo (0.14%), potasio (2.12%), calcio (0.27%), zinc (35.17 mg/100g), hierro (15.15 mg/100g), cobre (11.67 mg/100g) y sodio (103.5 mg/100g). La presenta investigación demuestra que las hojas de P. aduncum poseen un elevado contenido de polifenoles totales con potencial antioxidante que pueden ser usadas en la industria alimentaria, cosmética y farmacéutica.