Automatisierte enzymatische Bestimmung von Glucose, Maltose und Stärke auf Mikrotiterplatten

Abstract

Es wird eine automatisierte Methode zur Zucker‐ und Stärkebestimmung beschrieben. Die Eliminierung methodisch bedingter Fehler bei der optischen Vermessung der Mikrotiterplatte sowie die Auswertung der 96 Rohdaten erfolgt mit dem Softwareprogramm „LBR1993”︁. Die Analytik basiert auf einer 10minütigen Substrathydrolyse durch Glucoamylase bei Zimmertemperatur und Bestimmung der Glucose mit der GOD‐PAP‐Methode. Eine Wiederfindungsrate größer 99% sowohl für Mais‐ als auch für Kartoffelstärke wird erreicht, wenn die Stärke bei 100°C durch α‐Amylase in α‐Dextrine umgewandelt und diese nachfolgend mit 8,88 g Glucoamylase/g Substrat verzuckert werden. Bei Kartoffelstärke führt das Dispergieren in 1 N Natronlauge bei Zimmertemperatur zu einer Wiederfindungsrate von 93%. Das Erhitzen (60°C) in 0.5 N Natronlauge (AFNOR‐Methode) ist zur Analyse von Zuckern sowie bestimmter Stärkearten ungeeignet.