Avaliação da radiomarcação da anexina A5 com Tecnécio-99m: influência do método de marcação nas propriedades físicos-químicas e biológicas do composto

Abstract

Tese apresentada como parte dos requisitos para obtenção do grau de Doutor em Ciências na Área de Tecnologia Nuclear -Aplicações Orientadora: Dra. Elaine Bortoleti de Araújo AGRADECIMENTOS À Dra. Elaine, minha orientadora, pela confiança e compreensão diante às minhas inúmeras dificuldades, pela paciência e amizade em todo este tempo de convivência e pelo tempo que ainda há de vir; À Dra. Kayo pela autorização e orientação para utilização do microscópio; À Miriam Suzuki pelas horas incansáveis de contribuição que foram essenciais à realização deste trabalho; À Elizabeth Somessari e Carlos Gaia do Centro de Tecnologia das Radiações e ao Dr. Patrick do Centro de Biotecnologia pela disposição e disponibilidade em nos ajudar; À Dra. Emiko pelo apoio e ensinamentos que perdurarão para sempre; À Msc. Marycel Figolz de Barbosa e à Dra. Maria Tereza Colturato pelo incentivo constante levando-me a esperança e vontade de vencer; À Dra. Áurea pelo vasto conhecimento transmitido, pela amizade e apoio; À Márcia e Renata pela solidariedade, companheirismo e amizade que em muitos momentos foram o meu alicerce durante o percurso do meu doutorado; À Lílian, Carlos, Rosalina e Sara pelo apoio, ajuda, carinho e paciência durante este tempo, obrigada pela amizade; Às Msc. Aline e Priscilla não só pelo exemplo de profissionalismo, mas também pelos momentos de prazer e descontração mesmo diante das responsabilidades exigidas em diversas situações, obrigada pela amizade; À Adriana Ferreira, Ana Cristina, Gleide Alencar, Márcia Cristina, Sandra Mara, pois existem pessoas que mesmo à distância emitem energia, apoio e amizade;ABSTRACT Annexin A5 (ANXA5) is an intracellular human protein of 36 kDa with high affinity for membrane-bound phosphatidylserine that is selectively exposed on the surface of cells undergoing apoptosis. Apoptosis is important in normal physiology and innumerous pathologic states. Clinical applications for ANXA5 imaging are being developed in oncology, organ transplantation and cardiovascular diseases. Many strategies to radiolabel the protein have been described, including direct labeling, derivatization through a bifunctional chelanting agent (BFC), production of mutated protein or peptide analogs. Several 99m Tc-labeling techniques have been reported using different cores, including [Tc=O] +3 , [Tc]HYNIC, [Tc≡N] +2 and [Tc(CO 3 )] +1 . In this study, we evaluated the influence of 99m Tc cores on biological behavior and physico-chemical properties of radiolabeled annexin. Radiolabeling procedure using [Tc≡N] +2 core was a two-step procedure including the reaction of 99m TcO 4 with SDH in the presence of SnCl 2 and PDTA to obtain the intermediate 99m TcN-SDH, and successive addition of ANXA5. The results obtained were not satisfactory, despite the high efficiency in the production of the intermediate. The [Tc=O] +3 core was produced using the ethylenedicysteine (EC) as BFC. TSTU was LISTA DE FIGURAS

Desenvolvimento de método para separação química de Gálio-67 pela técnica de difusão térmica

“…(86) em 1973, utilizaram alvos de 68 Zn eletrodepositados em níquel, em substrato de cobre [ Zn (p, 2n) 67 Ga]. A difusão do níquel sobre o cobre impede a formação da liga metálica Zn-Cu, evitando a contaminação da câmara de vácuo onde fica o porta-alvo, facilitando a separação e purificação do 67 Ga produzido e impedindo a reação 65 Cu (p, n) 65 Zn, que contamina o 67 Ga e o 68 Zn.…”

“…A solução foi transferida para a coluna de troca catiônica Bio-Rad AG 50W-X8. O cobre e o 65 Zn foram eluídos com HCl concentrado e o 67 Ga com 10 mL de HCl 3,5 mol L -1 . HELUS e MAIER-BORST (72) produziram 67 Ga a partir do bombardeamento de alvos de zinco natural com deutêrons e partículas .…”

“…EL-AZONY e colab. (99) demonstraram o uso da resina aniônica Dowex 21K para a separação do 67 Ga das impurezas 65 Zn e 61 Cu, resultante da irradiação com prótons de alvo de zinco natural eletrodepositado em discos de cobre. O experimento mostrou que o cobre e o zinco ficaram fortemente ligados a resina, o 67 Ga foi eluído em tampão citrato de sódio 0,1 mol L -1 com pureza radionuclídica de 81%.…”

“…Zinco Natural -64, 66, 67, 68, Zn 67 Ga 78 horas 184 66 Ga 9,49 horas 1039 65 67 GaCl 3 é 0,0 e para os complexos Citrato- 67 Ga é 0,9 (20) .…”

“…TABELA 8 -EMISSÃO DE ELÉTRONS PRODUZIDOS PELO DECAIMENTO DO 67 GA(73) Ga é produzido em cíclotron a partir do bombardeamento de alvos de nat Zn (Zinco Natural),64,66,68 Zn (Zinco-64, 66, 68),65 Cu (Cobre-65), nat Ge (Germânio Natural) ou59 Co (Cobalto-59) com prótons, dêuterons, partículas , 11 B (Boro-11) ou 12 C (Carbono-12). As principais reações nucleares para sua produção estão relacionadas na TAB.…”