As mamadeiras, apesar de serem importantes e fornecerem uma praticidade aos pais e cuidadores, são objetos de fácil contaminação. A manipulação por diversas pessoas e a não desinfecção correta podem expor a criança a inúmeros microrganismos patogênicos. O objetivo deste trabalho foi a realização de analise microbiológica de mamadeiras em escolas de educação infantil, com respectiva identificação dos possíveis microrganismos encontrados e estudo da eficácia de três técnicas de desinfecção, sendo elas a técnica com hipoclorito de sódio, a técnica de fervura e o teste com vinagre de álcool. As mamadeiras foram escolhidas aleatoriamente, e a identificação microbiológica foi realizada conforme Manual da Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Foram testadas, em triplicatas, três técnicas de desinfecção, sendo elas as técnicas com hipoclorito de sódio, a técnica de fervura, e a utilização de vinagre de álcool. De trinta amostras, oito apresentaram crescimento bacteriano, sendo identificados os seguintes microrganismos: Staphylçococcus spp., coagulase negativa, em duas amostras da escola municipal, Klebsiella pneumonie e Escherichia coli em seis amostras coletadas na escola da rede particular. A técnica de fervura se mostrou mais eficaz na desinfecção das cepas testadas. Os resultados mostraram que existem falhas nos processos de limpeza e desinfecção das escolas, visto que houve crescimento de bactérias patogênicas. Ressalta-se a importância de revisão das técnicas de desinfecção com os responsáveis, visando garantir melhores condições higiênico-sanitárias nestes ambientes.