El objetivo de la presente investigación fue evaluar las potencialidades del control biológico de peces y copépodos sobre mosquitos (Diptera: Culicidae) de importancia higiénica-sanitaria en la provincia Villa Clara, Cuba. Los principales criaderos permanentes de culícidos de los 13 municipios con que cuenta la provincia Villa Clara, Cuba fueron muestreados, con el objetivo de evaluar alternativas de control biológico. Los resultados mostraron que las especies de mosquitos mejor representados y distribuidas en la provincia correspondieron a Anopheles albimanus, chlerotatus mediovittata, O. taeniorhynchus, Psorophora confinnis, Culex quinquefasciatus y C. nigripalpus. En cuanto a los peces: Gambusia punctata, Girardinus metallicus, Poecilia reticulata, Limia vittata y Nandopsis tetracanthus fueron los mejor representados. Se corroboró in vitro, que el copépodo Mesocyclops aspericornis es capaz de depredar eficientemente a las larvas de C. quinquefasciatus. El análisis de efectividad y riesgo-beneficio entre el insecticida Propoxur, Bacillus thurigiensis y peces larvívoros, muestra que este último es la mejor alternativa de control. El uso de agentes biológicos es una alternativa simple y relativamente económica dentro de los programas integrados de control de mosquito transmisores de enfermedades en Villa Clara, Cuba, por lo que debe de potenciarse mucho más el empleo de dichas alternativas de control biológico.