Binding of ATP to nucleoside‐diphosphate kinase: a kinetic study

Abstract

The binding of nucleotides to pig heart nucleoside-diphosphate kinase was studied using Rose Bengal as an optical probe. ATP, in the absence of Mg 2+ binds slowly to the enzyme, with a second order rate con-, stant of about 3000 M-W', whereas in its presence the binding is much faster. This finding suggests the regulation of the nucleoside-diphosphate kinase activity by uncomplexed ATP, and that ATP binds normally to the enzyme via a metal ion bridge.

Purification, properties and specificity of a NDP kinase from Alyssum murale grown under Ni2+ toxicity

“…The autophosphorylation of NDPK-B is not strange given that roughly one-third of protein kinases are autophosphorylated (Newton et al, 1987). The autophosphorylation activity of NDPK-B is metal-dependent (data not shown), as are NDP kinases from pig and Escherichia coli cells (Lascu et al, 1986;Ohtsuki et al, 1984). In contrast, all the other NDP kinases that have been reported have the ability to undergo autophosphorylation in the absence of metal.…”

Similarities and differences in the properties of multiple NDP-kinase isoforms of Alyssum murale, Ni2+-accumulator species

“…The autophosphorylation of NDPK isoforms of A. murale is not strange, given that roughly one-third of protein kinases are autophosphorylated (Newton et al, 1987). The autophosphorylation activity of R-NDPK-B was metal dependent, as are NDP-kinases from pig and Escherichia coli cells (Ohtsuki et al, 1984;Lascu et al, 1986). However, all the other investigated NDP-kinases, including S-NDPK-A and S-NDPK-B, were able to undergo autophosphorylation when the metal was absent (not shown).…”

Καθαρισμός Ιδιότητες Και Εξειδίκευση Ισομορφών Κινασών Των Διφωσφονουκλεοζιτών Από Ενδοσπέρμιο Καλαμποκιού - Μοριακές Προσεγγίσεις

“…Κατά συνέπεια η αντίδραση της αυτοφωσφορυλίωσης δεν απαιτεί την παρουσία μεταλλικών ιόντων για τη διεκπεραίωσή της, εκτός ορισμένων εξαιρέσεων π.χ. NDP κινάση από χοίρο (Huitorel et al, 1984;Lascu et al, 1986) και E. coli NIH-J (Ohtsuki et al, 1984). Σε αντίθεση με την πρώτη αντίδραση (αυτοφωσφορυλίωση) η συνολική αντίδραση μεταφοράς της φωσφορικής ομάδας στο διφωσφονουκλεοζίτη είναι μεταλλοεξαρτώμενη, συνεπώς η δεύτερη αντίδραση απαιτεί την παρουσία δισθενούς κατιόντος για την ολοκλήρωσή της (Knowles 1980).…”

“…Το αντιαλλεργικό φάρμακο chromoglycate αναστέλλει τη δράση της με Ki 2mM . Η ιωδιωμένη ξανθινική χρωστική (Rose Bengal) έχει Kd 0,9 μΜ για το ελεύθερο ένζυμο και αρκετά χαμηλότερη συγγένεια για το φωσφορυλιωμένο (Lascu et al, 1986). Αυτή και η ερυθροσίνη έχουν χρησιμοποιηθεί ως ανταγωνιστές της σύνδεσης των νουκλεοτιδίων στην NDP κινάση (Robinson et al, 1981;Lascu et al, 1983).…”

“…Η φωσφορυλίωση του ενζύμου με σύστημα αναγέννησης έδειξε ότι η κάθε υπομονάδα φωσφορυλιώνεται (Presecan et al, 1989) ενώ προηγούμενες μελέτες έλεγαν ότι μόνο 3-4 υπομονάδες φωσφορυλιώνονταν ανά εξαμερές Edlund and Engstrom 1974 Colomb et al, 1974). Επιπλέον η θέση σύνδεσης του ADP έχει τα χαρακτηριστικά μιας θέσης ελέγχου που καθορίζει τη συγγένεια με το ATP (Lascu et al, 1986).…”