Zusammenfassung: Es wird eine Mikromethode zur Bestimmung freier bzw. gebundener N-Acetyl-Neuraminsäure (NANA) in Glykoproteinen auf der Grundlage der Periodatoxidation und Thiobarbituratreaktion beschrieben. Die Methode zeichnet sich durch einfache Durchführbarkeit bei Verwendung des Mikrolitersystems Eppendorf aus. Die Nachweisempfindlichkeit liegt bei 0,2 nmol NANA im Testansatz. Die Präzision in der Serie beträgt 3,0%, die Langzeitpräzision 4,3% (VK). Die Richtigkeit der erhaltenen Ergebnisse wurde durch Vergleichsuntersuchungen mit der Makromethode nach Warren ((1959), J. Biol. Chem. 234, 1971Chem. 234, -1979 an Referenzmaterial (Sialyllactose, Transferrin, Fibrinogen) unter Beweis gestellt.
A micromethod for the determination ofN-acetylneuraminic acid in glycoproteinsSummary: A micromethod is described for the determination of free or glycoprotein-bound N-acetylneuraminic acid ( ) on the basis of oxidation with periodic acid and reaction with thiobarbiturate. When using the Eppendorf microliter system the method is easy to perform, the lowest level of sensitivity being 0.2 nmoles NANA in the incubation mixture. The intraassay precision comprises 3.0% CV, the interassay precision 4.3% CV. The accuracy of the results obtained by this micromethod was proved by comparative experiments with the macromethod according to Warren ((1959), J. Biol. Chem. 234, 1971 using sialyllactose, transferrin and fibrinogen as reference materials.
Einführung