Cinétique et caractérisation du phénomène “apoptosis-like” induit au cours de la congélation des spermatozoïdes bovins

Abstract

RESUMELa congdlation des spermatozo'ides ejacul6s bovins induit une mortalitd cellulaire elevee. Au cours d'une etude pr~liminaire, nous avions decrit qu'elle s'accompagne d'un processus oO apparaissent plusieurs caracteristiques pr~coces de I'apoptose : i) diminution du potentiel de membrane mitochondrial (A~=), ii) activation des caspases, iii) augmentation de la permeabilitd membranaire, sans apparition des caracteristiques tardives : iv) pas de fragmentation de I'ADN.Pour pr~ciser ce mecanisme, nous avons etudie s6par~-ment I'effet des differentes etapes de la congelation des spermatozoi"des bovins : dilution dans le milieu de congdlation, equilibration et cong~lation dans I'azote liquide/ddcongelation. L'apoptose et la r~action acrosomique ont dt~ analysees en cytometrie en flux et la prdsence d'AIF (Apoptosis Inducing Factor) en western blot. Nous avons observe que la dilution dans ie milieu de congelation induisait immddiatement une augmentation massive de la proportion de spermatozofdes avec un A~ = faible.Puis, d~s I'~quilibration, la proportion de spermatozo'fdes contenant des caspases actives commence a augmenter. Apres le processus complet de congelation/decong~la-tion, cette population est maximale et la permdabilite membranaire apparait. Ces resultats montrent que ie processus "apoptosis-like" est declench~ des les premieres etapes de la congelation. Nous avons aussi mis en ~vi-dence la prdsence d'AIF, ce qui suggere I'implication d'une vole inddpendante des caspases, annexe & la vole des caspases.

Phosphatidylserine translocation in human spermatozoa from impaired spermatogenesis

“…Additionally, phosphatidylserine externalization was expressed with a higher frequency in the purified fractions of spermatozoa with low motility (Barroso et al, 2000(Barroso et al, , 2006Weng et al, 2002). However, others did not find any correlation between sperm apoptosis and semen quality (Ricci et al, 2002;Lachaud et al, 2004;Martin et al, 2005).…”

“…The presence of translocated phosphatidylserine in human ejaculated spermatozoa has also been studied. In semen, increased rates of externalized phosphatidylserine were associated with decreased sperm motility (Oosterhuis et al, 2000;Shen et al, 2002;Weng et al, 2002;Barroso et al, 2006;Varum et al, 2007), normal morphology (Shen et al, 2002) or concentration (Ricci et al, 2002), whereas no association to abnormal semen parameters was found by others (Barroso et al, 2000;Ricci et al, 2002;Lachaud et al, 2004;Martin et al, 2005). These contradictory results mostly derived from the criteria used for group classification, which were based on individual semen parameters without taking into consideration all of them together.…”