RESUMOEsta pesquisa objetiva propor a utilização de metodologias ativas como ferramenta no processo de ensino e aprendizagem. Com o intuito de se aprofundar no tema, foi realizada nas bases de dados on line uma análise nos documentos norteadores (BNCC e PCNs) (sites do MEC), artigos científicos (scielo, sciesedirect e google acadêmico) e livros publicados na área para um conhecimento mais amplo assim como uma pesquisa com 39 docentes do ensino fundamental II, de escolas públicas e privadas no município de São Luís no período de janeiro a agosto de 2021, utilizando questionário validado google forms enviado via plataformas digitais com a finalidade de conhecer as dificuldades e demandas quanto ao ensino de microbiologia. Após à análise documental os conteúdos de microbiologia das séries do Ensino fundamental II foram selecionados e o questionário mostrou que os professores possuem idade produtiva trabalhando 40 horas semanais nos dois turnos. Dos entrevistados, 97% estudaram microbiologia na graduação, porém, 67% não ministram aulas práticas, 10% não conhecem as metodologias ativas e 18% não utilizam em suas aulas. Com esse diagnóstico, elaborou-se uma cartilha, com conteúdo e técnicas de metodologias ativas que podem ser utilizadas como material complementar no ensino da microbiologia. A cartilha foi elaborada no software Canva e validada por 22 juízes com IVC global de 0.97. Portanto, espera-se que esta cartilha seja uma ferramenta útil para os professores do ensino fundamental II, tornando o Ensino da Microbiologia mais dinâmico para os alunos da Educação Básica.