Comparative electrophoretic profile of proteins and esterases in healthy silkworm larvae ( Bombyx mori Lineu, 1758) and infected with nucleopolyhedrovirus

Abstract

ABSTRACT. Total proteins and esterases from silk gland extracts of Bombyx mori silkworm were characterized and compared with electrophoretic profiles of prepared extracts with silkworm glands infected with nucleopolyhedrovirus (BmNPV). SDS-PAGE (7%) gels was used for the total proteins, and 10% native PAGE for esterases. In the silk glands extracts of healthy silkworms, it was observed seven protein zones with molecular weight varying between 10 kDa (P1) and 60 kDa (P7). In the infected silkworms, a new zone named P8 (90 kDa) was also detected. Esterases activity at 5 th instar larvae underwent changes after the infection with BmNPV, since there was a reduction (EST-6 and EST-7) and an increase (EST-8) in the intensity of the regions of esterases activity, and specificity of EST-9 to β-naphthyl acetate. Those alterations observed in the expression of genes after the infection with the nucleoplyhedrovirus can be used as markers to detect infections in B. mori.Keywords: viral infection, silk gland, isoenzymes, SDS-PAGE, molecular markers.Perfil eletroforético comparativo de proteínas e esterases em lagartas de bicho da seda (Bombyx mori Lineu, 1758) saudáveis e infectadas por nucleopoliedrovírus RESUMO. Nesse estudo foram identificadas e comparadas as alterações das proteínas totais e esterases em extratos de glândula sericígena de lagartas de Bombyx mori sadias e infectadas por nucleopoliedrovírus (BmNPV), empregando eletroforese SDS-PAGE com géis a 7% para proteínas totais, e PAGE a 10% para esterases. Nos extratos de glândulas sericígenas de lagartas saudáveis, foram observadas sete regiões proteicas com peso molecular que variam entre 10 kDa (P1) a 60 kDa (P7). Naquelas infectadas pelo BmNPV, uma nova região denominada de P8 (90 kDa) foi detectada. A atividade das esterases no 5º instar larval sofreu alterações após a infecção pelo BmNPV porque houve redução (EST-6 e EST-7) e aumento (EST-8) na intensidade das regiões de atividade de esterases; e especificidade da EST-9 com o substrato β-naftil acetato. Essas alterações na expressão gênica, após a infecção pelo nucleopoliedrovírus, poderão ser utilizadas como marcadores para detecção da infecção em B. mori.Palavras-chave: infecção viral, glândula de seda, isoenzimas, SDS-PAGE, marcadores moleculares.