Durante a produção do etanol ocorre a geração de grandes volumes de vinhaça e a disposição final desta é realizada principalmente por meio da fertirrigação nos canaviais. Poucos trabalhos abordam o uso combinado de bactérias e vinhaça na fertirrigação da cultura da cana-de-açúcar. Assim, objetivou-se avaliar as alterações no pH e no teor de fósforo em vinhaça inoculada com Bacillus subtilis e a influência do emprego da vinhaça inoculada no desenvolvimento inicial de mudas de cana-de-açúcar. O experimento foi desenvolvido em duas etapas, na etapa I o delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 4 tratamentos e 3 repetições, T1 - 100% vinhaça; T2 - 50% vinhaça; T3 - 100% vinhaça inoculada com 1 x 109 UFC de B. subtilis e T4 - 50% vinhaça inoculada com 1 x 109 UFC de B. subtilis. Avaliou-se o pH e os teores de fosforo aos 0 e 7 dias após a inoculação. Já a etapa II o experimento foi realizado com delineamento inteiramente casualizado, com 6 tratamentos e 4 repetições: ¹Tratamentos: T1 – 100 ml de água com aplicação duas vezes por semana; T2 – 100 ml de vinhaça com aplicação duas vezes por semana; T3 – 100 ml de vinhaça + 1 x 109 UFC de B. subtilis com aplicação duas vezes por semana; T4 – 100 ml de água + 1 x 109 UFC de B. subtilis com aplicação duas vezes por semana; T5 – 100 ml de vinhaça + 1 x 109 UFC de B. subtilis com aplicação quinzenal; T6 – 100 ml de água + 1 x 109 UFC de B. subtilis com aplicação quinzenal. A cada quinze dias avaliou-se a emissão de brotos e, após 90 dias avaliou-se o comprimento, massa úmida e massa seca da raiz, altura, massa úmida e massa seca da parte aérea e o de número de raízes. Na etapa I verificou-se que a inoculação da vinhaça com B. subtilis promoveu disponibilização de fósforo, sem modificações significativas no pH. Já na etapa II, a aplicação de vinhaça associada à bactéria promoveu maior crescimento radicular, demonstrando, assim, ser uma prática viável e benéfica.