Hypatia de Alexandria (a primeira grande matemática da história, aproximadamente 355 d.C.) v AGRADECIMENTOS Agradeço imensamente ao Prof. Dr. Aldo Tonso, pela orientação prestada, sinceridade, humanidade, transparência, paciência e caráter, sem o qual este projeto seria totalmente inviável. Agradeço aos meus pais, Rita de Cássia e João Batista, por tudo o que fizeram por mim. Agradeço aos amigos do Grupo de Engenharia de Bioprocessos: em especial a Guilherme Fabri, pelo constante apoio e sobretudo troca de informações sobre biorreatores; a Gabriela Carmignotto, principalmente no tocante às técnicas de purificação; a Carla Reis, pelo auxílio em técnicas experimentais e a Letícia Parizotto, pela amizade, companhia durante experiências e auxílio na análise de amostras. Agradeço também a Daniela Teruya, Bianca Peres, Julia Ortiz e Rafael Risnik pelas discussões e paciência, que fizeram meu trabalho crescer. Agradeço às funcionárias Orlinda e Andreia, pelo apoio imprescindível e grandes ensinamentos, principalmente no início da minha fase experimental. Agradeço aos professores Dr. Adriano Azzoni e Dr. Thiago Basso que, dentro do departamento, contribuíram para que meu trabalho evoluísse. Agradeço à Profª Dr.ª Carla Celedônio, chefe da equipe da Fiocruz Rondônia, e à Dr.ª Soraya dos Santos Pereira, pesquisadora, pela parceria, doação das cepas e presteza de informações, sempre que solicitadas. Agradeço ao CNPq pelos proventos durante a vigência da bolsa. Agradeço a todos os meus amigos e familiares que, direta ou indiretamente, auxiliaram na formação da minha conduta e me incentivaram a concluir meu projeto de mestrado. Por fim, agradeço a todo aquele que fez uma crítica do meu trabalho e me permitisse evoluir. vi RESUMO Em caso de envenenamento ofídico, o tratamento no Brasil hoje é realizado pela administração de soros geralmente produzidos por equinos, que apresentam eficácia limitada: são úteis para os efeitos sistêmicos, mas não inibem efetivamente a evolução dos danos locais, podem causar reações adversas e apresentam alto custo de produção. De acordo com a Organização Mundial da Saúde (OMS), trata-se de uma doença negligenciada pelas autoridades científicas mundiais. O presente projeto, em parceria com o Instituto de Pesquisas em Patologias Tropicais da Fundação Oswaldo Cruz-Rondônia, propõe a produção por Escherichia coli de fragmentos de anticorpos de cadeia pesada de camelídeos, denominados VHH, contra as toxinas do veneno de Bothrops jararacussu, utilizando biorreator. Neste trabalho há interesse em produzir VHH, através da otimização do crescimento desta E. coli. A cinética do crescimento bacteriano foi realizada em shaker orbital sob diferentes condições, variando tamanho do frasco, rotação do shaker, composição do meio de cultura e concentração de substrato; e em biorreatores, alternando meios de cultura e modo de operação do reator (descontínuo e descontínuo alimentado), alterando a vazão de alimentação (linear e exponencial) O processo cinético é fortemente limitado pela formação de acetato, por condiçõ...