Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae), es un árbol nativo de Argentina, Brasil, Paraguay y Uruguay, con importante potencial económico. Su propagación y conservación están limitados por la característica recalcitrante de sus semillas, siendo el cultivo de tejidos un método eficiente para estos fines. En este trabajo se evaluó el efecto del tipo de explante y distintas combinaciones de reguladores de crecimiento vegetal, BAP, TDZ y ANA en la formación de brotes adventicios, enraizamiento y formación de plántulas de E. involucrata. Se desarrollaron tres experimentos: inducción, diferenciación de brotes y aclimatización en invernáculo de las plántulas obtenidas. Las hormonas BAP y TDZ indujeron callos y brotes a partir de segmentos nodales, radiculares y foliares. El máximo porcentaje de formación de brotes por organogénesis directa se obtuvo en segmentos nodales cultivados en medio MS ½ con 2,25 mg/L de BAP y la máxima frecuencia de formación de callos se obtuvo en explantos nodales o radiculares cultivados en medio MS ½ con TDZ, solo o combinado con ANA. La máxima formación de brotes adventicios, por organogénesis indirecta, se obtuvo en segmentos nodales, inducidos en medio MS ½ con 1,1 mg/l de TDZ+0,93 mg/l de ANA y subcultivados en medio MS ½ con 0,5 mg/l de TDZ +1 g/l de carbón activado. Los ápices de los brotes obtenidos a partir de organogénesis directa e indirecta enraizaron in vitro en medio MS ½ libre de RCV formando plántulas que luego se aclimataron en invernáculo, demostrando un alto porcentaje de supervivencia a los seis meses de trasplante.