Cultivo primario de células ciliadas de adenoides humanos: Un modelo experimental para evaluar la actividad ciliar in vitro

Abstract

Introducción: El clearance mucociliar normal es el mecanismo de defensa básico de las vías respiratorias. Sin embargo, los mecanismos de control ciliar aún se desconocen. Con el fin de entenderlo mejor, se han desarrollado diferentes técnicas de cultivo de células ciliadas. Objetivos: Desarrollar un modelo experimental a partir de cultivos primarios de tejido adenoídeo y cornete medio. Caracterizar la respuesta a adenosin trifosfato (ATP), agonista conocido de la frecuencia de batido ciliar (FBC). Material y método: Cultivos primarios a partir de explantes de epitelio adenoídeo y cornete medio humano. Medición de FBC, con técnica de microfotodensitometría, en condición basal y en respuesta a ATP a diferentes concentraciones. Resultados: La FBC basal (promedio (X) ±desv. estándar (DE)) para los cultivos de cornete medio fue 11,9 ±1,5 Hz y para tejido adenoídeo fue 10,9 ±1,9 (p >0,05). Se observó un aumento en la FBC en respuesta a ATP, dosis dependiente. No hubo diferencia significativa en la FBC basal ni en la respuesta a ATP entre cultivos de cornete medio y adenoides. Conclusión: El cultivo primario de células ciliadas nasales a partir de explantes de adenoides, es un modelo experimental reproducible, en el que es posible observar actividad ciliar y una respuesta funcional concordante con lo descrito en la literatura.

TNFα modifica la respuesta de la frecuencia de batido ciliar a la carga viscosa, asociado a alteraciones en el calcio intracelular en células ciliadas respiratorias humanas

“…Los cultivos primarios se realizaron con el método introducido por Verdugo y cols 13 , que permite obtener monocapas confluentes de células epiteliales, descrito previamente 14 . Brevemente, el epitelio adenoideo es cortado en trozos de 2-4 mm, que son depositados en cubreobjetos pretratados con gelatina al 0,1%, y éstos en cámaras de Rose.…”

“…La técnica descrita previamente 14 , consiste en el análisis de las fluctuaciones de luz que genera el movimiento de los cilios y que son detectadas por un fotodiodo asimétrico montado en el plano fotográfico del microscopio de fase 16 . El sistema que actualmente está montado en el laboratorio, permite la detección de la frecuencia en células ciliadas individuales que contienen aproximadamente 50-100 cilios por célula.…”

Análisis Morfológico en El Procesamiento Óptico-Digital De Imágenes Para El Diagnóstico De La Disquinesia Ciliar

“…Dentro de esta membrana se incluyen nueve pares de microtúbulos periféricos (MTP) y un par de microtúbulos centrales (PMC), denominada la disposición 9 + 2. Los microtúbulos se encuentran a lo largo de todo el citoesqueleto; es un grupo complejo de estructuras citoplasmáticas que interactúan armónicamente constituyendo la base del movimiento ciliar (González, 2007).…”