Resumo Objetivo Construir um bundle para prevenção de infecção primária da corrente sanguínea relacionada a cateter que contemple cuidados de enfermagem para manuseio do cateter de acesso venoso central por inserção periférica em neonatos. Métodos Pesquisa metodológica, desenvolvida no ano de 2017 em três etapas: levantamento bibliográfico, construção do instrumento e validação de conteúdo por cinco juízes. O instrumento para validação foi composto por 21 cuidados de enfermagem selecionados na primeira etapa. O índice de validade de conteúdo acima de 80% foi utilizado para avaliar a concordância entre os juízes, esta etapa foi realizada em uma única rodada. Resultados Dos 21 itens avaliados pelos juízes, dez foram excluídos por apresentarem índice de validade de conteúdo menor que 0,80 e três foram agrupados ao demais cuidados elencados. A versão final do bundle foi composta por oito itens. Os cuidados incluídos foram relacionados a higienização das mãos antes e após as manuseio, o uso de seringas com calibre adequado, troca e desinfecção das dânulas e dos conectores com álcool 70%, teste de permeabilidade e cuidados com curativos. Conclusão O estudo permitiu elaborar e validar junto a juízes um bundle para manuseio do cateter central de inserção periférica em neonatos com vistas a redução de infecção primária da corrente sanguínea relacionada ao cateter de acesso venoso central por inserção periférica.