Der Analysen-Leerwert beim Radioimmunoassay: Einflüsse auf die unspezifische Antigen-Bindung und ihr Effekt auf die Richtigkeit der Ergebnisse bei der Insulin-Bestimmung

Abstract

Zusammenfassung: Die unspezifische Bindung hat als Analysen-Leerwert bei radioimmunologischen Testverfahren eine außerordentliche Bedeutung für die Qualitätskontrolle. Da Proben-und Standard-Antigen zumeist nicht in identischen Medien vorliegen, das Medium seinerseits aber die Höhe von Antigen-Antikörper-Bindung und unspezifischer Bindung beeinflußt, kann daher ein Effekt auf die Richtigkeit der Ergebnisse nicht ausgeschlossen werden. Anhand der Insulin-Bestimmung kann demonstriert werden, daß es bei Adsorptions-Trenntechniken (dextranbeladene Aktivkohle, Ionenaustauscher) zu einem Anstieg der unspezifischen Bindung mit zunehmendem Alter des markierten Antigens kommt, bei chemischen Präzipitations-Trenntechniken (Natriumsulfit, Polyethylenglycol 4000) dagegen nicht. Aus einem Vergleich der für unterschiedliche Antigen-Konzentrationen ohne Antiserum ermittelten unspezifischen Bindungen (ÜB) und derjenigen mit Antiserum und Antigen-Überschuß (ÜB') geht hervor, daß ÜB und UB ; identisch sind und daß ÜB unabhängig vom Antigen/Antikörper-Verhältnis konstant ist. Die Antigen-Antikörper-Bindungen der Standards können daher durch ÜB oder ÜB' korrigiert werden. Aufgrund der Konstanz von ÜB ist das vereinfachte Verfahren zulässig, ÜB für einen Standard zu ermitteln und zur Korrektur der weiteren Standards zu verwenden.Anhand der Untersuchung von Diabetikerseren wird gezeigt, daß Serumproben, die Antikörper oder Autoantikörper enthalten, mit Hilfe der individuellen unspezifischen Bindungen erkannt und dann von der Testauswertung ausgeschlossen werden können, wobei Unterschiede zwischen ÜB und ÜB' Hinweise auf das Ausmaß der Teststörung geben.Die Richtigkeit der Ergebnisse bei der Insulin-Bestimmung ist von der Summe der Einflüsse abhängig, die das Medium für die Standards, die Art der Trenntechnik und die Korrektur für die individuellen unspezifischen Bindungen auf den Test ausüben. In variabler Testdurchführung durch Kombination unterschiedlicher Medien für die Standards ( a) Pufferlösung mit Immunglobulin vom Rind, b) insulinarmes Humanserum, c) Pufferlösung mit Humanalbumin und Immunglobulin vom Rind) mit drei Trenntechniken (Aktivkohle/Dextran, Natriumsulfit, Polyethylenglycol 4000) und drei Verfahren zur Korrektur für die unspezifischen Bindungen werden die Ergebnisse aus WiederfindeVersuchen einander gegenübergestellt. Aus dem Vergleich der Resultate wird abgeleitet, daß eine Korrektur für die individuelle unspezifische Bindung bei Standards und Proben notwendig ist. The analytical blank in radioimmunoassay. Factors influencing the unspecific binding of antigen and its effects on the accuracy of the results for the insulin assaySummary: The use of unspecific binding as an analytical blank in radioimmunoassay is very important in quality control. Since the media of the sample and the standard are usually different, and since the medium influences the binding of the antigen to the antibody as well as unspecific binding of the antigen, an effect on the accuracy of the results may riot be excluded.For insulin radioimmuno...