Desenvolvimento de um método analítico rápido e eficiente para a determinação de corticosteróides plasmáticos por injeção direta em coluna cromatográfica ISRP-C18 por CLAE

Abstract

resumo: O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um método analítico simples, rápido e eficiente para a determinação de corticosteróides (cortisona, corticosterona, acetato de hidrocortisona e acetato de dexametasona) em amostras sangüíneas de ratos empregando um sistema isocrático de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção ultravioleta. O método envolveu a injeção direta da amostra sangüínea em uma coluna cromatográfica com superfície interna de fase reversa (ISRP-C 18 ), empregando a fase móvel composta por tampão fosfato pH 4,0: acetonitrila (65:35 v/v). A detecção dos analitos foi obtida, através de um detector de ultravioleta de comprimento de onda variável (Varian Modelo 2550) ajustado em 240 nm e um integrador SP 4400 Chromaject (Varian Associates, Inc, Sunnyvale, CA, USA). A extração do analito resultou em valores de recuperação entre 90% e 108%, e coeficiente de variação entre 1,1% a 2,5%. Os limites de detecção e quantificação do método foram de 0,02 e 0,04 µg mL -1 , respectivamente. Assim, o método analítico proposto possibilitou a injeção direta (on-line) da amostra sem tratamento prévio apresentando também várias vantagens, tais como: rapidez, exatidão, precisão e especificidade. palavras-chave: corticosteróides, amostra biológica, coluna ISRP-C 18 , CLAE. introdução CorticosteróidesOs corticosteróides também chamados de adrenocorticosteróides são hormônios de natureza esteroídica produzidos na porção cortical das glândulas adrenais, que estão localizados exata-mente no pólo superior de ambos os rins [1]. Estes hormônios são sintetizados a partir do colesterol e constituem três famílias: os glicocorticóides, os mineralocorticóides e os andrógenos adrenais. Os glicocorticóides atuam primariamente no metabolismo das proteínas, carboidratos e lipídios, e os principais hormônios endógenos são o cortisol e a corticosterona, como exemplos de sintéticos: cortisona, prednisona, metilprednisona, dexametasona, entre outros [2]. Os mineralocorticóides atuam