Detecção de inibidores de tripsina e atividade hemaglutinante em sementes de leguminosas arbóreas da amazônia

Abstract

RESUMODiferentes classes de proteínas são comuns em sementes de leguminosas, incluindo inibidores de tripsina e proteínas hemaglutinantes, as quais atuam sobre enzimas proteolíticas e sobre carboidratos da superfície celular, respectivamente. O objetivo deste trabalho foi quantificar, detectar e caracterizar parcialmente a ocorrência dessas proteínas em sementes de Tachigali plumbea, Sesbania exasperata e Ormosia costulata var. trifoliolata. Sementes das três espécies foram moídas e submetidas à extração salina (NaCl 0,15M -10 %, p/v). Os extratos totais obtidos foram utilizados para quantificar o conteúdo protéico, detectar a atividade residual da tripsina, a atividade hemaglutinante (AHE) e na obtenção do perfil protéico. A atividade residual da tripsina foi observada somente para T. plumbea e S. exasperata, cujos valores foram 4 e 19 %, respectivamente. A AHE foi detectada nos extratos das três espécies, sendo que os extratos totais de T. plumbea e S. exasperata, hemaglutinaram eritrócitos de rato, camundongo e hamster, enquanto que a espécie O. costulata hemaglutinou somente eritrócitos de hamster. O perfil protéico em SDS-PAGE revelou maior ocorrência de proteínas com massa molecular aparente de 10 a 30 kDa para T. plumbea e S. exasperata, enquanto que para O. costulata prevaleceram bandas protéicas com massa molecular variando entre 20-25 kDa. Conclui-se que os extratos totais de O. costulata e S. exasperata, pertencentes à subfamília Papilionoideae, apresentam menor conteúdo de inibidores de tripsina que T. plumbea (Caesalpinioideae) e, quanto à AHE, os resultados mostraram-se diferenciados, mesmo entre as espécies da mesma subfamília, tanto para a concentração mínima hemaglutinante quanto para a especificidade de interação com os eritrócitos.PalavRaS-chavE: Serinoproteinases, Sementes, Lectinas, Eritrócitos. Detection of trypsin inhibitors and hemagglutinating activity in tree leguminous seeds of amazonianaBSTRacT Different classes of proteins are common in Leguminosae seeds, including trypsin inhibitors and hemagglutinin proteins, which act on proteolytic enzymes and cell-surface carbohydrates, respectively. The aim of this work was to quantify, to detect and characterize partially these proteins in seeds of Tachigali plumbea, Sesbania exasperata and Ormosia costulata var. trifoliata. Seeds of the three species were powdered and submitted to an extraction with a saline solution (NaCl 0.15M -10%, p/v). The resulting total extracts were used to quantify proteins content, detect the residual trypsin activity, hemagglutinating activity (AHE) and the proteic profile. Residual trypsin activity was observed only for T. plumbea and S. exasperata, which values were 4 and 19% respectively. AHE was detected in extracts of all three species, total extracts of T. plumbea and S. exasperata hemagglutinated erythrocytes of rats, mice and hamsters, whereas O. costulata had this effect only on hamster erythrocytes. The proteic profile obtained by SDS-PAGE showed that T. plumbea and S. exasperata have a higher content of ...

Atividade antitríptica de proteínas em polpas e sementes de frutas tropicais

“…Já era esperado encontrar essa atividade de inibição nas polpas de frutas (ARAÚJO et al, 2004) e, principalmente, nas sementes (CHEVREUIL et al, 2009), visto que tal fato já é bastante claro e repercutido na literatura. Tem-se, ainda, que esses inibidores, para melhor conhecimento dos mesmos, têm sido detectados e, tão logo, isolados e purificados (SANTOS et al, 2012).…”

“…Nessa vertente, os inibidores de serinoproteases, amplamente distribuídos nos alimentos de origem vegetal (CHEVREUIL et al, 2009), destacam-se por uma atuação que se consolida no ramo de pesquisas, buscando claramente elucidar seus complexos mecanismos de ação. Estes, no trato intestinal, atuam inibindo a ação de enzimas digestivas, como a tripsina, que são responsáveis pela digestão das proteínas dietéticas, sendo, em animais, constatado que estes inibidores provocam o aumento do pâncreas (hipertrofia e hiperplasia) e hipersecreção de enzimas digestivas DUARTE et al, 2010).…”

“…Nos alimentos de origem vegetal, inclusive nas frutas e em suas polpas, os inibidores proteicos de enzimas também estão presentes, mas apresentam-se predominantemente em sementes e em leguminosas (CHEVREUIL et al, 2009).…”

Ação hipocolesterolêmica de hidrolisados de feijões caupi (Vigna unguiculata L. Walp)

“…*Fcrufarinha integral; Fcoz -Farinha de originada de feijão cozido Carbonaro (1993) KOO, LEE, et al, 2005;PAK, KOO, KASYMOVA, et al, 2005;PAK et al, 2006). Pak et al (2005) Dados na literatura remetem o fato desses inibidores possuírem massa molecular de 8 a 30 kDa, por isso é improvável que inibidores de proteases tenham agido no centro catalítico da HMGR inibindo-a, já que são moléculas bem maiores do que as presentes nos hidrolisados utilizados nos ensaios (OLIVEIRA et al, 2002;PEREIRA, 2005;CHEVREUIL et al, 2009).…”