Detecção do DNA do herpesvírus eqüino 1 pela reação em cadeia pela polimerase em cavalos inoculados com a estirpe brasileira A4/72

Abstract

Sete cavalos adultos de status sanitário convencional foram inoculados por via intranasal com a estirpe brasileira A4/72 do herpesvírus eqüino tipo 1 (EHV-1). Nos primeiros dez dias após a inoculação viral, todos os cavalos apresentaram manifestações de infecção respiratória leve e restrita às vias aéreas anteriores. Apesar de possuírem títulos de anticorpos neutralizantes antes da inoculação, alguns cavalos apresentaram soroconversão após o desafio viral. O EHV-1 não foi isolado a partir das secreções nasais e leucócitos sanguíneos periféricos (PBL) de nenhum animal. Entretanto, o DNA viral foi detectado pela reação em cadeia pela polimerase (PCR) nos PBL entre o terceiro e o oitavo dias pós-inoculação (d.p.i.) em todos os animais, indicando a ocorrência de viremia. Além disso, a prova de PCR detectou o vírus nas amostras do lavado broncoalveolar a partir do nono d.p.i. na maioria dos animais. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que a PCR é uma técnica com alta sensibilidade e especificidade para o diagnóstico do EHV-1, capaz de detectar a presença do DNA viral mesmo quando não ocorre a constatação do agente pelos métodos tradicionais.

Viremia and nasal shedding for the diagnosis of equine herpesvirus‐1 infection in domesticated horses

“…A total of 60 experimental EHV‐1 infection studies met our inclusion criteria 24‐83 . The key characteristics of these studies are reported in Table 2.…”

“…Four studies failed to detect virus in nasal swab samples using virus isolation. 44,56,60,78 In 1 case, PCR detected EHV-1 DNA in the nasal swab samples. 44 Combined intranasal and intravenous administration of EHV-1 strain Army 183 to horses resulted in negative nasal and PBMC samples.…”

“…The majority (19/23) of these studies demonstrated 100% sensitivity using this method. 25,29,36,37,45,52,53,57,60,[65][66][67]72,73,75,77,79,80,82…”

“…24,25,[32][33][34][35][36]43,50,54,55,61,[63][64]70 Viremia also decreased over time and remained detectable in some horses ≥21 days after inoculation (Table 1). 29,50,60,65,75,79 In the majority of experimental studies, duration and/or range of EHV-1 detection in nasal secretions by culture and/or PCR was reported. [24][25][26][27][28][29][32][33][34][35][36][37][38][39][40][41][42][43][44][45][46][47][48][49][50][52][53][54]…”

“…A total of 47 studies used virus isolation methods to detect EHV-1. 24,[26][27][28][29][30][31][32][33][34][35][38][39][40][41][42][43][44][47][48][49][50]52,[54][55][56][57][58][59][60][61][62][63][64][65][66][67][68][69][70][71]74,[76][77][78][79]82 In these studies, RK-13 cells were used in the majority (66%) of the experiments. A total of 23 studies used PCR either as the only method or in combination with virus isolation.…”