Detección y estadificación molecular del cáncer vesical mediante RT-PCR a tiempo real para gelatinasas (MMP-2, MMP-9) y TIMP-2 en sangre periférica

Abstract

PALABRAS CLAVENeoplasia vesical; Estadificación molecular; RT-PCR; MMP-2; MMP-9; TIMP-2 ResumenIntroducción: La estadificación molecular del cáncer vesical basada en la detección de ARNm de genes específicos de urotelio no ha sido concluyente. Analizamos si la evaluación de gelatinasas (MMP-9, MMP-2) y TIMP-2 en sangre periférica mediante RT-PCR a tiempo real permite diagnosticar y caracterizar pacientes con neoplasia vesical. Material y método: Se ha extraído ARN total a partir de células sanguíneas circulantes en 42 individuos (11 controles sanos, 31 pacientes con cáncer vesical en diversos estadios) y se ha llevado a cabo RT-PCR a tiempo real empleando cebadores específicos para MMP-9, MMP-2, TIMP-2 y 18S ribosomal. Los valores de cuantificación del ARNm se describen como relativos a ARNm 18S (método Ct comparativo) y los resultados se comparan de forma ciega con los datos obtenidos mediante diagnóstico histológico y estadificación clínica. Resultados: Los niveles normalizados de ARNm de MMP-9 y MMP-2 son más altos en pacientes con cáncer que en controles (1,82 ± 0,6veces y 2,7 ± 0,6veces, respectivamente; p < 0,05). Los pacientes con enfermedad metastática también tienen niveles mayores de ARNm de MMP-9, MMP-2 y TIMP-2 (9,6 ± 0,20veces, 5,22 ± 0,26veces y 1,97 ± 0,22veces, respectivamente; p < 0,05). MMP-9 y MMP-2 también se asocian con estadio clínico y grado avanzado (p < 0,05). Se propone un índice entre variables que aumenta la habilidad para segregar pacientes con tumores Ta, T1, T2-4M0 y T2-4M1. Conclusiones: La identificación de tumor vesical y la estadificación molecular de la enfermedad resulta posible mediante la detección de gelatinasas y TIMP-2 en sangre periférica empleando RT-PCR a tiempo real. La capacidad de distinguir enfermedad metastásica es mayor para MMP-9, pero MMP-2 discrimina mejor los niveles de invasión tumoral. La investigación futura en este campo podría aportar resultados prometedores en la evaluación molecular de la neoplasia vesical.

Advances in Liquid Biopsy for Diagnosis of Bladder Cancer

“…There were differences in the expression of C10orf116 and KRT19 between patients and controls. Uroplakin II, cytokeratin (CK) 20, CK-19, and epidermal growth factor receptor mRNA in the blood may be useful markers for BCa [ 54 ] and matrix metalloproteinase (MMP)-2, MMP-9, and tissue inhibitors of metalloproteinase-2 mRNA levels are increased in the peripheral blood of BC patients [ 55 ].…”