Detection and Characterization of Hepatitis C Virus RNA in Seminal Plasma and Spermatozoon Fractions of Semen from Patients Attempting Medically Assisted Conception

Abstract

To investigate the risk of transmission of hepatitis C virus (HCV) via semen in assisted reproduction techniques, semen samples from 32 men chronically infected with HCV attending a center for assisted procreation were tested for HCV RNA by a reverse transcription-PCR protocol by using a modified version of the Cobas AMPLICOR HCV assay (version 2.0; Roche Diagnostics). The sensitivity of the test was 40 copies/ml. Four of 32 seminal plasma samples (12.5%) were found to be positive for the presence of HCV RNA. The median HCV load in blood was significantly higher in patients who were found to be positive for the presence of HCV RNA in semen than in those who tested negative (P ‫؍‬ 0.02). In one man, seven consecutive seminal plasma samples tested positive for HCV RNA, as did two consecutive motile spermatozoon fractions; the corresponding fractions obtained after migration of the spermatozoa remained negative. Despite the absence of the proven infectivity of virus in semen samples that test positive for HCV RNA, these findings highlight the fact that seminal fluid may exhibit prolonged HCV RNA excretion. The usefulness of HCV RNA detection in both seminal plasma and spermatozoon fractions before the start of a program of medically assisted reproduction in couples in whom the male partner is chronically infected with HCV would need to be evaluated prospectively with a larger population of subjects exhibiting HCV RNA in their semen.The risk of transmission of hepatitis C virus (HCV) via seminal fluid is still much debated, especially in assisted reproductive techniques (ART). Even though the rate of HCV transmission by the sexual route has been found to be low (1, 9), the use of spermatozoa from men chronically infected with HCV in ART can lead to a theoretical risk of contamination for the female partner, for the technicians dealing with ART, and perhaps for the artificially conceived embryos of the couple or of other couples treated at the same time or stored in the same container. The management of HCV-infected men enrolled in programs of medically assisted reproduction is highly dependent upon the definition of standardized protocols of detection of HCV RNA in semen. Actually, although previous studies have reported the presence of HCV RNA in seminal plasma of men chronically infected with HCV and coinfected (7, 10, 15) or not coinfected (12, 13) with human immunodeficiency virus (HIV), other investigators have found the opposite pattern (6,8,16). Those contradictory results could be explained, at least in part, by the heterogeneity of the populations studied and by the diversity and the poor standardization of the techniques used for the extraction of RNA from semen and for the reverse transcription (RT)-PCR protocols. Moreover, the cellular fractions of semen, particularly the motile spermatozoa, have been poorly investigated for the presence of HCV.We report herein on the detection of HCV RNA in seminal plasma and, for the first time, in the motile spermatozoon fractions of semen from men chronically infecte...

Occult Hepatitis C Virus Infection: Where are We Now?

“…HCV RNA has been detected in the peripheral blood mononuclear cells of chronically infected patients (Blackard et al, 2005, Laskus et al, 2000, Lerat et al, 1996, Lerat et al, 1998, Muller et al, 1993, Navas et al, 1998, in the central nervous system (Forton et al, 2004, Morsica et al, 1997, and other tissues like pancreas, thyroid, spleen (Laskus et al, 1998), seminal fluid (Bourlet et al, 2002. Negative strand HCV RNA was also detected, suggesting HCV replication.…”

Virus et sperme : implications pour l'assistance médicale à la procréation (AMP)

“…Une autre étude ultérieure portant sur 90 hommes avec une hépatite C chronique montrait à l'inverse l'absence d'ARN VHC dans les échantillons séminaux [18]. Depuis ces résultats contradictoires, l'amélioration des conditions techniques d'analyse a permis de confirmer la présence de VHC dans le sperme : le pourcentage de liquides séminaux positifs varie selon les études : de 20 à 44 % chez les sujets co-infectés VHC-VIH et de 5 à 15 % chez les sujets mono-infectés VHC [19][20][21][22][23].…”

Infection du tractus génital masculin : le point de vue du virologue

“…Une autre étude ultérieure portant sur 90 hommes avec une hépatite C chronique montrait à l'inverse l'absence d'ARN VHC dans les échantillons séminaux [37]. Depuis ces résultats contradictoires, l'amélioration des conditions techniques d'analyse a permis de confirmer la présence de VHC dans le sperme : le pourcentage de liquides séminaux positifs varie selon les études, et est globalement de 20 à 44 % chez les sujets co-infectés VHC/VIH et de 5 à 15 % chez les sujets mono-infectés VHC [38][39][40][41][42].…”

“…De même, pour Pekler et al [38], parmi les 29 liquides séminaux retrouvés positifs, 23 présentaient une charge virale faible (< 615 UI/ml), six échantillons possédant une charge virale supérieure à 615 UI/ml dont deux présentaient une valeur éle-vée supérieure à 10 000 UI/ml. Le VHC n'est généralement pas retrouvé dans les culots de spermatozoïdes après gradient de sélection [39][40][41][42]. Toutefois, un cas de détection positive dans un culot de spermatozoïdes mobiles a été rapporté, en précisant néanmoins que la détection d'ARN VHC s'est avérée négative dans ce même culot après migration ascendante [41].…”

“…Le VHC n'est généralement pas retrouvé dans les culots de spermatozoïdes après gradient de sélection [39][40][41][42]. Toutefois, un cas de détection positive dans un culot de spermatozoïdes mobiles a été rapporté, en précisant néanmoins que la détection d'ARN VHC s'est avérée négative dans ce même culot après migration ascendante [41].…”