Detection of rabies viral antigens in non‐autolysed and autolysed tissues by using an immunoperoxidase technique

Abstract

The objectives of this study were to determine the potential of an immunoperoxidase technique involving the avidin-biotin complex (ABC) stain for the diagnosis of rabies in fresh tissues and compare it with other standard methods, including the fluorescent antibody test (FAT), haematoxylin and eosin and Seller's stain, and to investigate its capacity to detect rabies antigen in autolysed tissues. Samples of non-autolysed brain from 81 domestic and wild animals suspected of having rabies were examined. Rabies antigen was detected by FAT in 41 of these samples and Negri bodies were detected in 40 (97.6 per cent) of them by the immunoperoxidase technique, in 25 by haematoxylin and eosin and in 22 by Seller's stain. The sensitivity of the immunoperoxidase technique decreased as the tissues were left to autolyse; after two days it was 91.2 per cent, after four days 70.6 per cent, and after seven days 11.8 per cent.

Análise imuno-histoquímica de cães naturalmente infectados pelo parvovírus canino

“…Diversos trabalhos apontam que a autólise tecidual prejudica o teste de imuno-histoquímica (Thür et al 1997, Arslan et al 2004, principalmente na detecção de agentes virais (Ramos-Vara et al1999). Entretanto, ór-gãos como língua e tonsila podem ser utilizados como tecidos auxiliares no diagnóstico de parvovirose canina principalmente, quando amostras de intestino delgado encontram-se autolisados.…”

Ocorrência de raiva em ovinos no Rio Grande do Sul

“…Essa região (tronco encefálico) foi selecionada para IHQ por ser a área de eleição para testes de marcação antigênica em bovinos (Bingham & van der Merwe 2002). A técnica de IHQ mostrou ser específica e sensível para a confirmação do diagnóstico e vem sendo usada como ferramenta adicional no diagnóstico de raiva em humanos e animais, principalmente em casos onde há somente meningoencefalite não-supurativa, sem CN, em casos em que as técnicas de IFD e ICC resultam negativas e na realização de estudos retrospectivos de material emblocado em parafina (Jogai et al 2000, Vural et al 2001, Arslan et al 2004, Pierezan et al 2007). Nos neurônios marcados positivamente eram observados antígenos virais distribuídos como finos grâ-nulos dispersos pelo citoplasma ou em densos agregados circulares de 3-10 μm de diâmetro.…”

Padronização da técnica de imuno-histoquímica para raiva em amostras de tecido do sistema nervoso central de bovinos fixadas em formol e emblocadas em parafina

“…Por vezes a detecção de antígenos do vírus da raiva por imuno-histoquímica tem sido relatada mesmo em tecido nervoso em processo de autólise (Arslan et al 2004). Estudos feitos com materiais deteriorados comprovaram que o primeiro exame que resulta em falso negativo é a detecção dos corpúsculos de Negri, seguido pela inoculação em camundongos e, por último, a imunofluorescência direta (Fernandes & RietCorrea 2007).…”

“…A imuno-histoquímica pode ser também usada, particularmente em estudos retrospectivos, quando tecidos frescos ou congelados não podem ser avaliados ou quando as amostras não podem ser enviadas ao laboratório imediatamente. (Arslan et al 2004).…”