Amblyomma aureolatum (Pallas, 1772) se distribuye en Sudamérica y posee importancia médica y veterinaria. En Uruguay se encuentra ampliamente distribuida parasitando vertebrados silvestres y domésticos y se la relaciona a casos de rangeliosis canina. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de organismos rickettsiales y piroplasmas en A. aureolatum del norte de Uruguay. Para ello se recolectaron 117 ninfas y adultos de A. aureolatum sobre zorros, perros y vegetación, así como una sobre un humano. Se extrajo ADN de las garrapatas obtenidas de animales y vegetación para realizar diferentes PCR utilizando cebadores dirigidos a genes para la detección de ADN de organismos Rickettsiales (Anaplasmataceae, Rickettsiaceae y Midichloriaceae) así como protozoarios del Orden Piroplasmida. Como resultados se obtuvieron tres secuencias, una para el gen gltA con una identidad de entre 99,4 a 100% con Rickettsia bellii, otra para el gen 16S ARNr con un 100% de identidad con Candidatus Midichloria sp. y la restante con 100% de identidad con Rangelia vitalii para el gen 18S ARNr. Estos resultados corresponden a los primeros reportes de R. bellii para el país y de Ca. Midichloria sp. y R. vitalii en A. aureolatum. Además, se reporta el primer caso de A. aureolatum parasitando humanos en Uruguay.