Development of a New Chemiluminescent Enzyme Immunoassay Using a Two-Step Sandwich Method for Measuring Aldosterone Concentrations

Abstract

In the present study, we developed a new chemiluminescent enzyme immunoassay (CLEIA) using a two-step sandwich method to measure aldosterone concentrations. We investigated serum and plasma aldosterone concentrations in 75 blood samples from 27 patients using a radioimmunoassay (RIA) and the CLEIA (with current and newly improved reagents) as well as liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). Based on the results of the Passing–Bablok regression analysis, the aldosterone levels measured using CLEIA with the new reagents and those measured by LC-MS/MS were found to be significantly correlated (slope, 0.984; intercept, 0.2). However, aldosterone levels varied depending on the measurement method (i.e., CLEIA with the new reagent, CLEIA with the current reagent, and RIA). Aldosterone levels were lower with the improved CLEIA method than with RIA and CLEIA using the current reagent. Therefore, the cutoff values of the screening test as well as those of the confirmatory test for primary aldosteronism (PA) should be adjusted to follow current clinical practice guidelines for PA. The formula that can be used to obtain the aldosterone level (pg/mL) when using CLEIA with the new reagent is 0.765 × RIA (pg/mL) − 33.7. This formula will enable PA cutoff values to be set for provisional screening and confirmatory tests.

Antibody Responses to BNT162b2 Vaccination in Japan: Monitoring Vaccine Efficacy by Measuring IgG Antibodies against the Receptor-Binding Domain of SARS-CoV-2

“…The Accuraseed is an automated immune analyzer based on a CLEIA method that combines antigen-antibody reaction and chemiluminescence reaction. This CLEIA method utilizes magnetic microparticles as a separating agent, which enables rapid measurement of RBD-IgG within about 10 min ( 34 ). Principles and procedures of RBD-IgG measurement using Accuraceed are shown in Fig.…”

Antibody responses to BNT162b2 vaccination in Japan: Monitoring vaccine efficacy by measuring IgG antibodies against the receptor binding domain of SARS-CoV-2

“…We utilized another laboratory test kit (18) for the Accuraseed automated immunoassay system (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation) to develop a CLEIA . CC-BY-ND 4.0 International license It is made available under a is the author/funder, who has granted medRxiv a license to display the preprint in perpetuity.…”

“…We utilized another laboratory test kit (18) for the Accuraseed automated immunoassay system (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation) to develop a CLEIA method to measure RBD-IgG in serum samples. Principle and procedures of RBD-IgG measurement by Accuraceed is shown in Fig.…”

Clinical Practice Guideline for the Diagnosis and Management of Primary Aldosteronism 2021

“…6．対象研究デザイン：観察研究，RCT/ 臨床試験，systematic review，meta-analysis，ガイラインを含 41) ，CLEIA 法 で は 66.2 pg/mL 42) ，54.6 pg/ mL 32) ，58.1 pg/mL 43) に止まり(臨床的治癒) 25,127) ，特に高齢者では国内の多施設の検討で 18％と報告されている 123) ．これ は，高血圧に関わる様々な生活習慣 5,124) に加えて，閉塞性睡眠時無呼吸(OSA) ，腎障害，肥満症など の合併によると考えられている 21,123,128) ．PA の OSA 合併率は 67.6％と報告されている 21) ．手術療法が 薬物治療と比べて，内服薬の減少を越える予後改善効果があるかは明らかでなかったが 5,6,25,129) ，末期 腎不全の新規発症率や生命予後改善を含めて，薬物治療より有効であることが海外の後ろ向きコホー ト研究で示された 74,[130][131][132] ．手術療法の第一選択は腹腔鏡手術であり，術前は MR 拮抗薬を含む降圧薬 で高血圧や低カリウム血症を治療しておく 5,6,25) ． 両側性 PA，片側性 PA でも手術を希望しない，あるいは併発症のため手術できない場合は，MR 拮 抗薬を第一選択とする薬物治療を行う…”

“…97 Suppl. October 2021 率は，海外の研究を対象としたメタ解析 (4000 例) の結果 165) では 50.6％，わが国のコホート研究 (JPAS) (574 例)では 32.6％であった 166) ．高血圧治癒を予測する因子として，JPAS の検討では，術前降圧薬 数が少ない，高血圧罹患期間が短い，性別が女性，BMI が低い，などの寄与が大であった 3) ．また， わが国の単施設での検討 (142 例) では，年齢が若い，腎機能が良い (GFR が高い) などの寄与が大であ ることも報告されている 167) ． 片側性 PA 術後の GFR の推移について，わが国単施設の検討(130 例)では，術後 6 か月で平均 19.7％の GFR の低下がみられ，それを予測する因子として，PAC 高値，血清カリウム濃度低値，術 前 GFR が高値，などの寄与が大であった 168) ．わが国の別施設の検討(102 例)では，血清カリウム濃 度低値とアルブミン尿が術後初期の GFR 低下の独立した予測因子であることが示された 8) ．JPAS の 検討(202 例)では，初期の GFR 低下が，長期的には腎機能の低下を抑制する指標であることも示さ れている 19) ． 片側性 PA 術後の高カリウム血症の出現については，多施設 (142 例) での検討では，9.9％に高カリ ウム血症を認め，高齢者，腎機能低下症例にその傾向が多くみられた 135) ．米国単施設の検討 (192 例) では，AVS 時の健側アルドステロン分泌の抑制が術後の高カリウム血症出現の独立した予測因子で あることが示された 169) ．韓国多施設での検討(124 例)では，一過性の高カリウム血症が 3.3％，持続 性の高カリウム血症が 7.3％に認められた 136) ．この報告では，高カリウム血症出現の有無と術前 PAC，PRA，MR 拮抗薬使用の有無とは有意な関連を認めなかったが，持続性高カリウム血症の出現 例では，高齢，長い罹病期間，大きい腫瘍径，術前 GFR 低値の傾向がみられた． Perspective 原発性アルドステロン症 (PA) の病因 PA の病因に関わる各種遺伝子変異が解明されてきている．家族性 PA(Familial hyperaldosteron-ism：FH) には 1-4 型があり PA の 1-5％を占める．FH 1 は CYP11B1 と CYP11B2 のキメラ遺伝子， FH 2 はクロライドチャネル遺伝子である CLCN2 遺伝子の胚細胞変異，FH 3 はカリウムチャネル遺 伝子 KCNJ5 遺伝子の胚細胞変異，FH4 はカルシウムチャネル遺伝子である CACNA1H 遺伝子の胚細 胞変異，が各々の原因であることが明らかになっている．孤発性のアルドステロン産生副腎腺腫 (APA)においても各種体細胞遺伝子変異が同定されている．特に KCNJ5 遺伝子の不活性化変異 170) は APA の約 30-60％で認められ，特徴的な DNA メチル化状態 171) やマイクロ RNA の発現様式 172) は RIA(スパック-S ア ルドステロンキット) 測定が主流となっていたが，2021 年 4 月以降，発売が中止され，複数の CLEIA による測定に変更となった．アルドステロン分析用ヒト血清とのトレーサビリティ，LC-MS/MS と の良好な相関，国際標準との整合性などの観点からも真値に近似する CLEIA 法による LC-MS/MS 相 当値を臨床的判断に用いることが推奨される．しかし，LC-MS/MS 相当値は従来の RIA よりも明ら かに低値32,43,174)…”