SIMULTANEOUS ANALYSIS OF BIOLOGICAL INDICATORS OF EXPOSURE TO ETHYLBENZENE, STYRENE, TOLUENE AND XYLENE SOLVENTS IN URINE BY HPLC-UV.A method for simultaneous analysis of phenylglyoxylic (PGA), mandelic (MA), hippuric (HA), orto-, meta-and para-methylhippuric (o-, m-and p-MHA) acids in urine, by high performance liquid chromatography with UV detection was developed and validated. The substances are biotransformation products used as biological indicators to assess the exposure of workers, respectively, to ethylbenzene, styrene, toluene and xylene. The urinary metabolites were separated using a C18 column and a mixture of 5 mM phosphate buffer pH 2.6:acetonitrile (92:8, v/v) as mobile phase. Urine samples were extracted with dichloromethane:ethyl acetate (70:30, v/v). The method used phenacetin as internal standard and was linear in the interval of 100-500 µg mL -1 for PGA and MA and 150-700 µg mL -1 for HA and MHA. The detection limits in µg mL -1, were 19.8 for PGA, 1.7 for MA, 4.1 for HA, 3.9 for o-MHA, 3.3 for m-MHA and 7.3 for p-MHA. Intra-and inter-assay precisions (as relative standard deviation) were all less than 15% and accuracy (as relative standard error) did not exceed 12.3%. The recovery was higher than 65% for all metabolites. The developed method will be applied to biological evaluation of workers exposure to these solvents.Keywords: volatile organic compounds; urine; biological monitoring; HPLC-UV.
INTRODUÇÃOOs compostos orgânicos etilbenzeno, estireno, tolueno e xileno são amplamente utilizados como solventes em indústrias de plástico, resina, borracha e farmacêutica.1-4 Também são constituintes de combustíveis, tintas, vernizes e colas. [4][5][6] Trabalhadores expostos a níveis elevados desses solventes podem apresentar efeitos adversos, como irritação (da pele e do trato respiratório), alterações do sistema nervoso central, alterações funcionais nos nervos ótico e óptico. 5 Portanto, a monitorização da exposição, tanto ambiental quanto biológica, são atividades complementares e fundamentais na prevenção de tais efeitos. A monitorização ambiental avalia o risco à saúde do indivíduo exposto através da concentração dos solventes na zona respiratória, comparando-a aos Limites de Exposição Ocupacional. Por sua vez, a monitorização biológica pode avaliar a dose interna do composto para verificar se a exposição do trabalhador está em níveis aceitáveis, por comparação com o respectivo Limite para o Indicador Biológico utilizado. Para os solventes, os marcadores biológicos (ou indicadores biológicos) podem ser a própria substância ou os seus metabólitos presentes em matrizes biológicas.
7A principal via de absorção do etilbenzeno, estireno, tolueno e xileno é a via respiratória e a eliminação ocorre, principalmente, através dos metabólitos urinários.5 Os principais metabólitos do etilbenzeno e do estireno são o ácido mandélico (AM) e o ácido fenilglioxílico (AFG). No entanto, esses metabólitos não são indicadores específicos, pois também são formados quando há exposição a outras substâncias, por exempl...